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    本發明揭示式(I)化合物或其前藥；□其中：R1為-CH2CF3或-CH2CH2CF3；R2為-CH2CF3、-CH2CH2CF3或-CH2CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；各Ra獨立地為F、Cl、-CN、-OCH3及/或-NHCH2CH2OCH3；且z為0、1或2。亦揭示使用該等化合物抑制洛奇蛋白(Notch)受體之方法，及包含該等化合物之醫藥組合物。此等化合物適用於治療、預防或減緩多種治療領域中之疾病或病症(諸如癌症)的進展。
    公开号:TW201309656A
    申请号:TW101106426
    申请日:2012-02-24
    公开日:2013-03-01
    发明作者:Claude Quesnelle；Soong-Hoong Kim；Francis Lee；Ashvinikumar Gavai
    申请人:Squibb Bristol Myers Co；
    IPC主号:C07D243-00
    专利说明:
    雙(氟烷基)-1,4-苯二氮呯酮化合物
    本發明大體係關於適用作洛奇蛋白(Notch)抑制劑之苯并二氮呯酮化合物。本發明進一步關於醫藥組合物，其包含至少一種本發明化合物，適用於治療與洛奇蛋白路徑有關之病狀(諸如癌症及其他增殖性疾病)。
    洛奇蛋白信號傳導涉及多個細胞過程，諸如細胞命運特化(cell fate specification)、分化、增殖、細胞凋亡及血管生成。(Bray,Nature Reviews Molecular Cell Biology,7：678-689(2006)；Fortini,Developmental Cell 16：633-647(2009))。洛奇蛋白為單次雜二聚跨膜分子。洛奇蛋白家族包括4種受體，即洛奇蛋白1至4，其在結合至DSL家族之配體(Delta-like 1、3、4及Jagged 1及2)後活化。
    洛奇蛋白之活化及成熟需要一系列加工步驟，包括由γ分泌酶介導之蛋白水解裂解步驟，γ分泌酶為含有早老素1(Presenilin 1)或早老素2(Presenilin 2)、呆蛋白(nicastrin)、APH1及PEN2之多蛋白複合物。在洛奇蛋白裂解後，洛奇蛋白細胞內結構域(NICD)自膜釋放。釋放之NICD移位至核中，在核中其與CSL家族成員(RBPSUH、「無毛抑制子(suppressor of hairless)」及LAG1)協力充當轉錄活化因子。洛奇蛋白目標基因包括HES家族成員，諸如HES-1。HES-1充當諸如HERP1(亦稱為HEY2)、HERP2(亦稱為HEY1)及HATH1(亦稱為ATOH1)之基因的轉錄抑制因子。
    洛奇蛋白路徑異常活化會促進腫瘤形成。洛奇蛋白信號傳導活化涉及各種實體腫瘤(包括卵巢癌、胰臟癌以及乳癌)及血液腫瘤(諸如白血病、淋巴瘤及多發性骨髓瘤)之發病機制。洛奇蛋白抑制之作用及其在治療各種實體及血液腫瘤中之效用係描述於Miele,L.等人，Current Cancer Drug Targets,6：313-323(2006)；Bolos,V.等人，Endocrine Reviews,28：339-363(2007)；Shih,I.-M.等人，Cancer Research,67：1879-1882(2007)；Yamaguchi,N.等人，Cancer Research,68：1881-1888(2008)；Miele,L.,Expert Review Anti-cancer Therapy,8：1197-1201(2008)；Purow,B.,Current Pharmaceutical Biotechnology,10：154-160(2009)；Nefedova,Y.等人，Drug Resistance Updates,11：210-218(2008)；Dufraine,J.等人，Oncogene,27：5132-5137(2008)；及Jun,H.T.等人，Drug Development Research,69：319-328(2008)中。
    仍需要適用作洛奇蛋白抑制劑且具有足夠代謝穩定性以提供有效量之藥物暴露的化合物。此外，仍需要適用作洛奇蛋白抑制劑且可經口或靜脈內投與患者之化合物。
    美國專利第7,053,084 B1號揭示適用於治療神經病症(諸如阿茲海默氏病(Alzheimer's Disease))的丁二醯胺基苯并二氮呯化合物。該參考案揭示此等丁二醯胺基苯并二氮呯化合物抑制γ分泌酶活性及與類澱粉蛋白神經沈積物形成有關之類澱粉前驅蛋白之加工。該參考案未揭示此等化合物用於治療諸如癌症之增殖性疾病的用途。
    本發明申請者已發現具有作為洛奇蛋白抑制劑之活性且在靜脈內或經口投藥後具有足夠代謝穩定性以提供有效量之藥物暴露的有效化合物。提供此等化合物以適用作具有對可用藥性而言重要之合乎需要之穩定性、生物可用率、治療指數及毒性值的藥物。
    本發明藉由提供適用作洛奇蛋白信號傳導路徑之選擇性抑制劑的雙(氟烷基)-1,4-苯并二氮呯酮化合物(包括其前藥)來滿足上述需要。
    本發明亦提供醫藥組合物，其包含醫藥學上可接受之載劑；及至少一種式(I)化合物或其前藥。
    本發明亦提供治療與洛奇蛋白受體之活性有關之疾病或病症的方法，該方法包含投與哺乳動物患者式(I)化合物或其醫藥學上可接受之前藥。
    本發明亦提供製備式(I)化合物或其前藥的方法及中間物。
    本發明亦提供用於療法中之式(I)化合物或其前藥。
    本發明亦提供式(I)化合物或其前藥用於製造用於治療癌症之藥物的用途。
    式(I)化合物及包含該等化合物之組合物為洛奇蛋白抑制劑且可用於治療、預防或治癒各種洛奇蛋白受體相關病狀。包含此等化合物之醫藥組合物適用於治療、預防或減緩多種治療領域中之疾病或病症(諸如癌症)的進展。
    本發明之此等及其他特徵將隨著揭示內容繼續而以展開形式闡述。
    藉由參考下文所述之隨附圖式來說明本發明。
    本發明之第一態樣提供式(I)化合物： 或其前藥；其中：R1為-CH2CF3或-CH2CH2CF3；R2為-CH2CF3、-CH2CH2CF3或-CH2CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；各Ra獨立地為F、Cl、-CN、-OCH3及/或-NHCH2CH2OCH3；且z為0、1或2。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CF3；且R2、R3、Ra及z係如在第一態樣中所定義。在此實施例中包括如下化合物，其中R2為-CH2CF3或-CH2CH2CF3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CH2CF3；且R2、R3、Ra及z係如在第一態樣中所定義。在此實施例中包括如下化合物，其中R2為-CH2CF3或-CH2CH2CF3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R2為-CH2CF3；且R1、R3、Ra及z係如在第一態樣中所定義。在此實施例中包括如下化合物，其中R1為-CH2CH2CF3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R2為-CH2CH2CF3；且R1、R3、Ra及z係如在第一態樣中所定義。在此實施例中包括如下化合物，其中R1為-CH2CH2CF3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R2為-CH2CH2CH2CF3；且R1、R3、Ra及z係如在第一態樣中所定義。在此實施例中包括如下化合物，其中R1為-CH2CH2CF3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R3為H；且R1、R2、Ra及z係如在第一態樣中所定義。在此實施例中包括如下化合物，其中R1為氘(D)或氚(T)。在此實施例中亦包括如下化合物，其中R1為-CH2CH2CF3且R2為-CH2CH2CF3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R3為-CH3；且R1、R2、Ra及z係如在第一態樣中所定義。R3包括一或多個氫原子經氘(D)及/或氚(T)同位素取代的甲基。在此實施例之一個實例中，R3為-CD3。在此實施例中亦包括如下化合物，其中R1為-CH2CH2CF3且R2為-CH2CH2CF3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中z為2且各Ra獨立地為F、Cl、-CN、-OCH3及/或-NHCH2CH2OCH3；且R1、R2及R3係如在第一態樣中所定義。在此實施例中包括如下化合物，其中R1為-CH2CH2CF3且R2為-CH2CH2CF3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中z為1且Ra為F、Cl、-CN、-OCH3或-NHCH2CH2OCH3；且R1、R2及R3係如在第一態樣中所定義。在此實施例中包括如下化合物，其中R1為-CH2CH2CF3且R2為-CH2CH2CF3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中z為0；且R1、R2及R3係如在第一態樣中所定義。在此實施例中包括如下化合物，其中R1為-CH2CH2CF3且R2為-CH2CF3或-CH2CH2CF3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CF3；R2為-CH2CF3；R3為H或-CH3；且z為0。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CF3；R2為-CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；且z為0。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CF3；R2為-CH2CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；且z為0。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CH2CF3；R2為-CH2CF3；R3為H或-CH3；且z為0。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CH2CF3；R2為-CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；且z為0。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CH2CF3；R2為-CH2CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；且z為0。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CF3；R2為-CH2CF3；R3為H或-CH3；z為1；且Ra為F、Cl、-CN、-OCH3及/或-NHCH2CH2OCH3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CF3；R2為-CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；z為1；且Ra為F、Cl、-CN、-OCH3及/或-NHCH2CH2OCH3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CF3；R2為-CH2CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；z為1；且Ra為F、Cl、-CN、-OCH3及/或-NHCH2CH2OCH3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CH2CF3；R2為-CH2CF3；R3為H或-CH3；z為1；且Ra為F、Cl、-CN、-OCH3及/或-NHCH2CH2OCH3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CH2CF3；R2為-CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；z為1；且Ra為F、Cl、-CN、-OCH3及/或-NHCH2CH2OCH3。
    一個實施例提供式(I)化合物或其前藥，其中R1為-CH2CH2CF3；R2為-CH2CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；z為1；且Ra為F、Cl、-CN、-OCH3及/或-NHCH2CH2OCH3。
    一個實施例提供根據技術方案1之化合物或其前藥，其選自：
    一個實施例提供根據技術方案1之化合物或其前藥，其選自：
    一個實施例提供根據技術方案1之化合物或其前藥，其選自：
    一個實施例提供根據技術方案1之化合物或其前藥，其選自：
    一個實施例提供選自以下之式(I)化合物：(2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(1)；(2R,3S)-N-((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(2)；(2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-3-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(3)；(2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-3-(2,2,2-三氟乙基)-2-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(4)；(2R,3S)-N-((3S)-1-(2H3)甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(5)；(2R,3S)-N-((3S)-7-氯-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(6)；(2R,3S)-N-((3S)-8-甲氧基-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(7)；(2R,3S)-N-((3S)-8-氟-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(8)；(2R,3S)-N-((3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(9)；(2R,3S)-N-((3S)-7-氟-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(10)；(2R,3S)-N-((3S)-8-氯-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(11)；(2R,3S)-N-((3S)-9-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(12)；(2R,3S)-N-((3S)-8-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(13)；(2R,3S)-N-((3S)-7-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(14)；(2R,3S)-N-((3S)-8-氰基-9-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(15)；(2R,3S)-N-((3S)-8,9-二氯-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(16)；(2R,3S)-N-((3S)-9-氟-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(17)；(2R,3S)-N-((3S)-9-氯-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(18)；(2R,3S)-N-((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-3-(4,4,4-三氟丁基)-2-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(19)；(2R,3S)-N1-((3S)-8-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-3-(4,4,4-三氟丁基)-2-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(20)；及(2R,3S)-N-((3S)-9-((2-甲氧基乙基)胺基)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(21)；及一或多種上述化合物之前藥。
    本發明可在不背離本發明之精神或基本特性下以其他特定形式體現。本發明涵蓋本文所述之本發明之態樣及/或實施例之所有組合。應瞭解，本發明之任何及所有實施例可連同任何其他實施例一起來描述其他實施例。亦應瞭解，實施例之各個別要素意欲與任何實施例之任何及所有其他要素組合以描述其他實施例。 定義
    本發明之特徵及優勢可由一般技術者在閱讀以下詳細描述後更容易地瞭解。應瞭解，出於清楚原因上文及下文在各別實施例之情況下描述之本發明之某些特徵亦可組合形成單個實施例。反之，出於簡潔原因在單個實施例之情況下描述之本發明之各種特徵亦可組合形成其子組合。本文識別為例示性或較佳之實施例意欲具說明性而非具限制性。
    除非本文另外特定說明，否則以單數形式提及亦可包括複數。舉例而言，「一(a)」及「一(an)」可指一個或一或多個。
    除非另外指示，否則任何具有不飽和價數之雜原子被認為具有足以滿足該等價數的氫原子。
    本文所闡述之定義優先於以引用方式併入本文中之任何專利、專利申請案及/或專利申請公開案中所闡述之定義。
    用於描述本發明之各種術語的定義列於下文中。當術語在整篇說明書(除非其在特定情況下另外限制)中個別地或作為較大團體之一部分使用時，此等定義均適用於該等術語。
    在整篇說明書中，基團及其取代基可由熟習本領域者選擇以提供穩定的部分及化合物。
    根據此項技術中所用之慣例，在本文之結構式中用於描繪作為部分或取代基與核心或主鏈結構之連接點的鍵。
    如本文所用之術語「鹵基」及「鹵素」指F、Cl、Br或I。
    如本文所用之術語「烷基」指含有例如1至12個碳原子、1至6個碳原子及1至4個碳原子之分支鏈與直鏈飽和脂族烴基。烷基之實例包括(但不限於)甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(例如正丙基及異丙基)、丁基(例如正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基)及戊基(例如正戊基、異戊基、新戊基)、正己基、2-甲基戊基、2-乙基丁基、3-甲基戊基及4-甲基戊基。當數字在符號「C」後以下標形式出現時，該下標更特定地定義特定基團可含有之碳原子數目。舉例而言，「C1-6烷基」表示具有一至六個碳原子之直鏈及分支鏈烷基。
    片語「醫藥學上可接受」在本文中用於指在正確醫學判斷範疇內適用於與人類及動物組織接觸而無過度毒性、刺激性、過敏反應或其他問題或併發症且與合理效益/風險比率相稱的彼等化合物、物質、組合物及/或劑型。
    式(I)化合物可以非晶形固體或結晶固體形式提供。可使用凍乾來提供呈固體狀之式(I)化合物。
    在本發明之範疇及精神內，任何可活體內轉化以提供生物活性劑(亦即式(I)化合物)之化合物為前藥。
    各種前藥形式在此項技術中為熟知的且描述於以下文獻中：a)Wermuth,C.G.等人，The Practice of Medicinal Chemistry，第31章，Academic Press(1996)；b)Bundgaard,H.編，Design of Prodrugs,Elsevier(1985)；c)Bundgaard,H.，第5章，「Design and Application of Prodrugs」，Krosgaard-Larsen,P.等人編，A Textbook of Drug Design and Development，第113-191頁，Harwood Academic Publishers(1991)；及d)Testa,B.等人，Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism,Wiley-VCH(2003)。
    另外，式(I)化合物在製備之後較佳分離及純化以獲得含有等於或大於99重量%之量之式(I)化合物(「實質上純」)的組合物，接著如本文所述使用或調配。該等「實質上純」之式(I)化合物在本文中亦涵蓋作為本發明之一部分。
    「穩定化合物」及「穩定結構」意欲指示足夠穩固而能夠自反應混合物中分離出達適用純度且能夠調配成有效治療劑的化合物。本發明意欲包含穩定化合物。
    「治療有效量」意欲包括有效充當洛奇蛋白受體抑制劑或有效治療或預防增殖性疾病(諸如癌症)的單獨本發明化合物的量、或所主張之化合物組合的量、或本發明化合物與其他活性成分組合的量。
    如本文所用之「治療(treating)」或r治療(treatment)」涵蓋治療哺乳動物(尤其人類)之疾病病況，且包括：(a)預防哺乳動物出現疾病病況，尤其在該哺乳動物易患該疾病病況但尚未診斷為患有該疾病病況時；(b)抑制疾病病況，亦即阻止其發展；及/或(c)減輕疾病病況，亦即使疾病病況消退。
    本發明化合物意欲包括本發明化合物中存在之原子之所有同位素。同位素包括原子序相同但質量數不同之彼等原子。以一般實例方式而非限制，氫之同位素包括氘(D)及氚(T)。碳之同位素包括13C及14C。同位素標記之本發明化合物可一般藉由熟習此項技術者所知之習知技術或藉由類似於本文所述之方法的方法，使用適當之同位素標記試劑替代否則使用之未經標記之試劑來製備。 實例1化合物之晶體形式
    在一個實施例中，實例1之化合物 係以包含一或多種結晶形式之結晶物質形式提供。實例1化合物之適合結晶形式之實例包括形式N-1、A-2及EA-3。
    在一個實施例中，實例1化合物係以包含第一結晶形式之結晶物質形式提供。實例1化合物之第一結晶形式包含本文稱作「形式N-1」或「N-1形式」之純結晶形式。
    在一個實施例中，實例1化合物之N-1形式的特徵在於約等於以下之單位晶胞參數：晶胞尺寸：a=9.41 Å b=17.74 Å c=31.94 Å α=90.0° β=98.4° γ=90.0°空間群：P21實例1之分子/不對稱單位：4單位晶胞中分子之體積/數目=659 Å3密度(計算值)=1.402 g/cm3，其中形式N-1之單位晶胞參數係在約-10℃之溫度下量測。
    在另一實施例中，實例1化合物之N-1形式的特徵在於實質上與圖1中所示之圖一致的模擬粉末x射線繞射(PXRD)圖及/或實質上與圖1中所示之圖一致的觀測PXRD圖。
    在另一實施例中，實例1化合物之N-1形式的特徵在於PXRD圖(在約25℃溫度下，CuKα λ=1.5418 Å)包含四個或四個以上，較佳五個或五個以上選自以下之2θ值：5.7±0.2、7.5±0.2、10.3±0.2、10.7±0.2、15.2±0.2、16.8±0.2、20.2±0.2及20.7±0.2，其中形式N-1之PXRD圖係在約20℃之溫度下量測。
    在另一實施例中，實例1之N-1形式的特徵在於實質上如表1中所列之原子分數座標。

    在另一實施例中，實例1化合物之N-1形式為實質上純的。
    在另一實施例中，實例1化合物之N-1形式含有以重量計至少約90 wt.%，較佳至少約95 wt.%，且更佳至少約99 wt.%之實例1化合物之形式N-1。
    在另一實施例中，實質上純實例1化合物之形式N-1具有實質上純相均質性，其中以實驗方式量測之PXRD圖之總峰面積的約10%以下，較佳約5%以下，且更佳約2%以下由模擬PXRD圖中不存在之峰產生。最佳，實質上純結晶形式N-1具有實質上純相均質性，其中以實驗方式量測之PXRD圖之總峰面積之約1%以下由模擬PXRD圖中不存在之峰產生。
    在另一實施例中，實例1化合物之結晶形式基本上由形式N-1組成。此實施例之結晶形式可包含以結晶形式之重量計至少約90 wt.%，較佳至少約95 wt.%，且更佳至少約99 wt.%之實例1化合物之形式N-1。
    在另一實施例中，提供醫藥組合物，其包含實例1化合物之形式N-1；及至少一種醫藥學上可接受之載劑及/或稀釋劑。
    在另一實施例中，醫藥組合物包含實質上純實例1化合物之形式N-1；及至少一種醫藥學上可接受之載劑及/或稀釋劑。
    在另一實施例中，治療有效量之實例1化合物之形式N-1與至少一種醫藥學上可接受之載劑及/或稀釋劑組合以提供至少一種醫藥組合物。
    在一個實施例中，實例1化合物係以第二結晶形式提供。第二結晶形式為丙酮溶劑合物結晶形式，在本文中稱作「形式A-2」或「A-2形式」。A-2形式每一實例1分子包含約一個丙酮分子。
    在一個實施例中，A-2形式的特徵在於約等於以下之單位晶胞參數：晶胞尺寸：a=9.25 Å b=17.11 Å c=19.63 Å α=90.0° β=99.2° γ=90.0°空間群：P21實例1之分子/不對稱單位：2單位晶胞中分子之體積/數目=767 Å3密度(計算值)=1.331 g/cm3，其中形式A-2之單位晶胞參數係在約-50℃之溫度下量測。
    在另一實施例中，A-2形式的特徵在於實質上與圖2中所示之圖一致的模擬粉末x射線繞射(PXRD)圖及/或實質上與圖2中所示之圖一致的觀測PXRD圖。
    在另一實施例中，實例1之A-2形式的特徵在於實質上如表2中所列之原子分數座標。

    在另一實施例中，實例1化合物之A-2形式為實質上純的。
    在另一實施例中，實例1化合物之A-2形式含有以第二結晶形式之重量計至少約90 wt.%，較佳至少約95 wt.%，且更佳至少約99 wt.%之形式A-2。
    在另一實施例中，實質上純第二結晶形式具有實質上純相均質性，其中以實驗方式量測之PXRD圖之總峰面積的約10%以下，較佳約5%以下，且更佳約2%以下由模擬PXRD圖中不存在之峰產生。最佳，實質上純第二結晶形式具有實質上純相均質性，其中以實驗方式量測之PXRD圖之總峰面積之約1%以下由模擬PXRD圖中不存在之峰產生。
    在另一實施例中，實例1化合物之第二結晶形式基本上由形式A-2組成。此實施例之第二結晶形式可包含以第二結晶形式之重量計至少約90 wt.%，較佳至少約95 wt.%，且更佳至少約99 wt.%之形式A-2。
    在一個實施例中，實例1化合物係以第三結晶形式提供。第三結晶形式為乙酸乙酯溶劑合物結晶形式，在本文中稱作「形式EA-3」或「EA-3形式」。EA-3形式每一實例1分子包含約一個乙酸乙酯分子。
    在一個實施例中，EA-3形式的特徵在於約等於以下之單位晶胞參數：晶胞尺寸：a=8.84 Å b=15.95 Å c=22.38 Å α=90.0° β=90.0° γ=90.0°空間群：P212121實例1之分子/不對稱單位：1單位晶胞中分子之體積/數目=789 Å3密度(計算值)=1.357 g/cm3，其中形式EA-3之單位晶胞參數係在約-50℃之溫度下量測。
    在另一實施例中，EA-3形式的特徵在於實質上與圖3中所示之圖一致的模擬粉末x射線繞射(PXRD)圖及/或實質上與圖3中所示之圖一致的觀測PXRD圖。
    在另一實施例中，實例1化合物之EA-3形式的特徵在於PXRD圖(在約25℃溫度下，CuKα λ=1.5418 Å)包含四個或四個以上，較佳五個或五個以上選自以下之2θ值：6.8±0.2、9.6±0.2、10.6±0.2、15.4±0.2、20.5±0.2、21.0±0.2及24.8±0.2，其中形式N-1之PXRD圖係在約20℃之溫度下量測。
    在另一實施例中，實例1之EA-3形式的特徵在於實質上如表3中所列之原子分數座標。
    在另一實施例中，實例1化合物之EA-3形式為實質上純的。
    在另一實施例中，實例1化合物之EA-3形式含有以第三結晶形式之重量計至少約90 wt.%，較佳至少約95 wt.%，且更佳至少約99 wt.%之形式EA-3。
    在另一實施例中，實質上純形式EA-3具有實質上純相均質性，其中以實驗方式量測之PXRD圖之總峰面積的約10%以下，較佳約5%以下，且更佳約2%以下由模擬PXRD圖中不存在之峰產生。最佳，實質上結晶形式EA-3具有實質上純相均質性，其中以實驗方式量測之PXRD圖之總峰面積之約1%以下由模擬PXRD圖中不存在之峰產生。
    在另一實施例中，實例1化合物之第三結晶形式基本上由形式EA-3組成。此實施例之第三結晶形式可包含以第三結晶形式之重量計至少約90 wt.%，較佳至少約95 wt.%，且更佳至少約99 wt.%之形式EA-3。
    在一個實施例中，實例1化合物係以第四結晶形式提供。第四結晶形式為四氫呋喃溶劑合物結晶形式，在本文中稱作「形式THF-2」或「THF-2形式」。THF-2形式每一實例1分子包含約一個四氫呋喃分子。
    在一個實施例中，THF-2形式的特徵在於約等於以下之單位晶胞參數：晶胞尺寸：a=9.34 Å b=16.44 Å c=20.60 Å α=90.0° β=102.8° γ=90.0°空間群：P21實例1之分子/不對稱單位：2四氫呋喃分子/不對稱單位：2體積=3082 Å3，其中形式THF-2之單位晶胞參數係在約-50℃之溫度下量測。
    在另一實施例中，THF-2形式的特徵在於實質上與圖4中所示之圖一致的模擬粉末x射線繞射(PXRD)圖及/或實質上與圖4中所示之圖一致的觀測PXRD圖。
    在另一實施例中，實例1化合物之THF-2形式的特徵在於PXRD圖(在約25℃溫度下，CuKα λ=1.5418 Å)包含四個或四個以上、較佳五個或五個以上選自以下之2θ值：6.9±0.2、9.6±0.2、11.2±0.2、12.6±0.2、16.6±0.2、21.4±0.2及24.2±0.2，其中形式N-1之PXRD圖係在約20℃之溫度下量測。
    在另一實施例中，實例1之THF-2形式的特徵在於實質上如表4中所列之原子分數座標。

    在另一實施例中，實例1化合物之THF-2形式為實質上純的。
    在另一實施例中，實例1化合物之THF-2形式含有以第四結晶形式之重量計至少約90 wt.%，較佳至少約95 wt.%，且更佳至少約99 wt.%之形式THF-2。
    在另一實施例中，實質上純形式THF-2具有實質上純相均質性，其中以實驗方式量測之PXRD圖之總峰面積的約10%以下，較佳約5%以下，且更佳約2%以下由模擬PXRD圖中不存在之峰產生。最佳，實質上結晶形式THF-2具有實質上純相均質性，其中以實驗方式量測之PXRD圖之總峰面積之約1%以下由模擬PXRD圖中不存在之峰產生。
    在另一實施例中，實例1化合物之第四結晶形式基本上由形式THF-2組成。此實施例之第四結晶形式可包含以第四結晶形式之重量計至少約90 wt.%，較佳至少約95 wt.%，且更佳至少約99 wt.%之形式THF-2。 實例2化合物之結晶形式
    在一個實施例中，實例2化合物 係以包含結晶形式之結晶物質形式提供。實例2化合物之適合結晶形式之實例為形式M2-1。M2-1形式每一實例2分子包含約兩個甲醇分子。
    在一個實施例中，實例2化合物之M2-1形式的特徵在於約等於以下之單位晶胞參數：晶胞尺寸：a=8.44 Å b=21.02 Å c=17.52 Å α=90.0° β=90.88° γ=90.0°空間群：P21實例2之分子/不對稱單位：2單位晶胞中分子之體積/數目=777 Å3密度(計算值)=1.297 g/cm3，其中形式M-1之單位晶胞參數係在約-100℃之溫度下量測。
    在另一實施例中，M2-1形式的特徵在於實質上與圖5中所示之圖一致的模擬粉末x射線繞射(PXRD)圖及/或實質上與圖5中所示之圖一致的觀測PXRD圖。
    在另一實施例中，實例2化合物之M2-1形式的特徵在於PXRD圖(在約25℃溫度下，CuKα λ=1.5418 Å)包含四個或四個以上，較佳五個或五個以上選自以下之2θ值：8.2±0.2、12.2±0.2、14.2±0.2、15.1±0.2、16.8±0.2、17.3±0.2及23.0±0.2，其中形式M2-1之PXRD圖係在約20℃之溫度下量測。
    在另一實施例中，實例2之M2-1形式的特徵在於實質上如表5中所列之原子分數座標。

    在另一實施例中，實例2化合物之M2-1形式為實質上純的。
    在另一實施例中，實例2化合物之M2-1形式含有以結晶形式之重量計至少約90 wt.%，較佳至少約95 wt.%，且更佳至少約99 wt.%之形式M2-1。
    在另一實施例中，實質上純形式M2-1之結晶形式具有實質上純相均質性，其中以實驗方式量測之PXRD圖之總峰面積的約10%以下，較佳約5%以下，且更佳約2%以下由模擬PXRD圖中不存在之峰產生。最佳，實質上純M2-1之結晶形式具有實質上純相均質性，其中以實驗方式量測之PXRD圖之總峰面積之約1%以下由模擬PXRD圖中不存在之峰產生。
    在另一實施例中，實例2化合物之結晶形式基本上由形式M2-1組成。此實施例之結晶形式可包含以結晶形式之重量計至少約90 wt.%，較佳至少約95 wt.%，且更佳至少約99 wt.%之形式M2-1。
    式(I)化合物可藉由任何適用於欲治療之病狀的方式投與，方式可視對部位特異性治療之需要或欲傳遞之式(I)化合物之量而定。
    本發明亦涵蓋一類醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其前藥；及一或多種無毒醫藥學上可接受之載劑及/或稀釋劑及/或佐劑(本文統稱作「載劑」物質)及必要時選用之其他活性成分。式(I)化合物可藉由任何適合途徑，較佳以適於該途徑之醫藥組合物形式且以有效用於預期治療之劑量投與。本發明之化合物及組合物可以含有習知醫藥學上可接受之載劑、佐劑及媒劑之劑量單位調配物形式，例如經口、經黏膜或非經腸(包括血管內、靜脈內、腹膜內、皮下、肌肉內及胸骨內)投與。舉例而言，醫藥載劑可含有甘露糖醇或乳糖及微晶纖維素之混合物。混合物可含有其他組分，諸如潤滑劑，例如硬脂酸鎂；及崩解劑，諸如交聯普維酮(crospovidone)。載劑混合物可填充至明膠膠囊中或壓製成錠劑。醫藥組合物可以例如口服劑型或輸注劑形式投與。
    對於經口投藥，醫藥組合物可呈例如錠劑、膠囊、懸浮液或液體形式。醫藥組合物較佳以含有特定量之活性成分的劑量單位形式製成。舉例而言，醫藥組合物可以包含約1 mg至2000 mg，較佳約1 mg至500 mg，且更佳約5 mg至150 mg範圍內之量的活性成分之錠劑或膠囊形式提供。雖然適用於人類或其他哺乳動物之日劑量可視患者之病狀及其他因素而廣泛變化，但可使用常規方法確定。
    本文涵蓋之任何醫藥組合物可例如經由任何可接受且適合之口服製劑來經口傳遞。例示性口服製劑包括(但不限於)例如錠劑、糖衣錠、口含錠、水性及油性懸浮液、可分散性散劑或顆粒劑、乳液、硬膠囊及軟膠囊、糖漿及酏劑。意欲經口投與之醫藥組合物可根據此項技術中已知用於製造意欲經口投與之醫藥組合物的任何方法來製備。為提供醫藥學上可口之製劑，本發明醫藥組合物可含有至少一種選自甜味劑、調味劑、著色劑、緩和劑、抗氧化劑及防腐劑之試劑。
    錠劑可例如藉由混合至少一種式(I)化合物與至少一種適用於製造錠劑之無毒醫藥學上可接受之賦形劑來製備。例示性賦形劑包括(但不限於)例如惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣及磷酸鈉；粒化劑及崩解劑，諸如微晶纖維素、交聯羧甲纖維素鈉、玉米澱粉及海藻酸；黏合劑，諸如澱粉、明膠、聚乙烯-吡咯啶酮及阿拉伯膠(acacia)；及潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸及滑石。另外，錠劑可無包衣，或藉由已知技術包覆包衣以掩蔽味道令人不悅之藥物的不良味道，或延遲活性成分在胃腸道中之崩解及吸收，從而使活性成分之作用持續較長時段。例示性水溶性味覺掩蔽物質包括(但不限於)羥基丙基甲基纖維素及羥基丙基纖維素。例示性時間延遲物質包括(但不限於)乙基纖維素及乙酸丁酸纖維素。
    硬明膠膠囊可例如藉由混合至少一種式(I)化合物與至少一種惰性固體稀釋劑(諸如碳酸鈣；磷酸鈣；及高嶺土(kaolin))來製備。
    軟明膠膠囊可例如藉由混合至少一種式(I)化合物與至少一種水溶性載劑(諸如聚乙二醇)；及至少一種油介質(諸如花生油、液體石蠟及橄欖油)來製備。
    水性懸浮液可例如藉由混合至少一種式(I)化合物與至少一種適用於製造水性懸浮液之賦形劑來製備。適用於製造水性懸浮液之例示性賦形劑包括(但不限於)例如懸浮劑，諸如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥基丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、海藻酸、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑，諸如天然存在之磷脂，例如卵磷脂；環氧烷與脂肪酸之縮合產物，諸如聚氧乙烯硬脂酸酯；環氧乙烷與長鏈脂族醇之縮合產物，諸如十七伸乙基-氧基十六醇；環氧乙烷與源自脂肪酸及己醣醇之偏酯的縮合產物，諸如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯；及環氧乙烷與源自脂肪酸及己醣醇酐之偏酯的縮合產物，諸如聚乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。水性懸浮液亦可含有至少一種防腐劑，諸如對羥基苯甲酸乙酯及對羥基苯甲酸正丙酯；至少一種著色劑；至少一種調味劑；及/或至少一種甜味劑，包括(但不限於)例如蔗糖、糖精及阿斯巴甜糖(aspartame)。
    油性懸浮液可例如藉由將至少一種式(I)化合物懸浮於植物油(諸如花生油；橄欖油；芝麻油；及椰子油)；或礦物油(諸如液體石蠟)中來製備。油性懸浮液亦可含有至少一種增稠劑，諸如蜂蠟；硬石蠟；及十六醇。為提供可口之油性懸浮液，可將至少一種上文已描述之甜味劑及/或至少一種調味劑添加至油性懸浮液中。油性懸浮液可進一步含有至少一種防腐劑，包括(但不限於)例如抗氧化劑，諸如丁基化羥基苯甲醚及α-生育酚。
    可分散性散劑及顆粒劑可例如藉由混合至少一種式(I)化合物與至少一種分散劑及/或濕潤劑；至少一種懸浮劑；及/或至少一種防腐劑來製備。適合之分散劑、濕潤劑及懸浮劑係如上文已描述。例示性防腐劑包括(但不限於)例如抗氧化劑，例如抗壞血酸。另外，可分散性散劑及顆粒劑亦可含有至少一種賦形劑，包括(但不限於)例如甜味劑；調味劑；及著色劑。
    至少一種式(I)化合物之乳液可例如製備成水包油乳液。包含式(I)化合物之乳液之油相可由已知成分以已知方式構成。油相可由(但不限於)例如植物油(諸如橄欖油及花生油)；礦物油(諸如液體石蠟)；及其混合物提供。雖然該相可僅包含乳化劑，但其可包含至少一種乳化劑與脂肪或油或與脂肪及油兩者之混合物。適合之乳化劑包括(但不限於)例如天然存在之磷脂，例如大豆卵磷脂；源自脂肪酸及己醣醇酐之酯或偏酯，諸如脫水山梨糖醇單油酸酯；及偏酯與環氧乙烷之縮合產物，諸如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。較佳，親水性乳化劑連同用作穩定劑之親脂性乳化劑一起包括在內。亦較佳包括油及脂肪兩者。具有或不具有穩定劑之乳化劑一起組成所謂乳化蠟，且該蠟與油及脂肪一起組成所謂乳化軟膏基質，該乳化軟膏基質形成乳膏劑調配物之油性分散相。乳液亦可含有甜味劑、調味劑、防腐劑及/或抗氧化劑。適用於本發明調配物中的乳化劑及乳液穩定劑包括吐溫(Tween)60、斯潘(Span)80、十六醇十八醇混合物(cetostearyl alcohol)、十四烷醇、單硬脂酸甘油酯、十二烷基硫酸鈉、單獨或與蠟一起之二硬脂酸甘油酯，或此項技術中熟知之其他物質。
    式(I)化合物亦可例如經由任何醫藥學上可接受且適合之可注射形式靜脈內、皮下及/或肌肉內傳遞。例示性可注射形式包括(但不限於)例如包含可接受之媒劑及溶劑(諸如水、林格氏溶液(Ringer's solution)及等張氯化鈉溶液)之無菌水溶液；無菌水包油微乳液；及水性或油性懸浮液。
    用於非經腸投與之調配物可為水性或非水性等張無菌注射溶液或懸浮液的形式。該等溶液及懸浮液可使用所提及之用於經口投與之調配物之一或多種載劑或稀釋劑或藉由使用其他適合之分散劑或濕潤劑及懸浮劑由無菌粉末或顆粒製備。該等化合物可溶解於水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化鈉、黃蓍膠及/或各種緩衝液中。其他佐劑及投藥方式在醫藥技術中為廣泛熟知的。活性成分亦可以含適合載劑(包括生理食鹽水、右旋糖或水)或含環糊精(亦即CAPTISOL®)、共溶劑溶解(亦即丙二醇)或微胞溶解(亦即吐溫80)的組合物形式藉由注射投與。
    無菌可注射製劑亦可為於無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮液，例如於1,3-丁二醇中之溶液。可使用的可接受之媒劑及溶劑為水、林格氏溶液及等張氯化鈉溶液。另外，無菌不揮發性油慣常用作溶劑或懸浮介質。出於此目的，可使用任何溫和之不揮發性油，包括合成單酸甘油酯或二酸甘油酯。另外，在可注射劑製備中可使用脂肪酸，諸如油酸。
    無菌可注射水包油微乳液可例如藉由以下來製備：1)將至少一種式(I)化合物溶解於油相(諸如大豆油與卵磷脂之混合物)中；2)組合含有式(I)之油相與水及甘油混合物；及3)加工該組合，形成微乳液。
    無菌水性或油性懸浮液可根據此項技術早已已知之方法來製備。舉例而言，無菌水溶液或懸浮液可用無毒非經腸可接受之稀釋劑或溶劑來製備，諸如1,3-丁二醇；且無菌油性懸浮液可用無菌無毒可接受之溶劑或懸浮介質來製備，諸如無菌不揮發性油，例如合成單酸甘油酯或二酸甘油酯；及脂肪酸，諸如油酸。
    可用於本發明醫藥組合物中之醫藥學上可接受之載劑、佐劑及媒劑包括(但不限於)離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂；自乳化藥物傳遞系統(SEDDS)，諸如d-α-生育酚聚乙二醇1000丁二酸酯；用於醫藥劑型中之界面活性劑，諸如吐溫、聚乙氧基蓖麻油，諸如CREMOPHOR界面活性劑(BASF)，或其他類似聚合傳遞基質；血清蛋白，諸如人血清白蛋白；緩衝物質，諸如磷酸鹽、甘胺酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸之偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質，諸如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態二氧化矽、三矽酸鎂、聚乙烯吡咯啶酮、基於纖維素之物質、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇及羊毛脂。環糊精(諸如α-環糊精、β-環糊精及γ-環糊精)或經化學修飾之衍生物(諸如羥基烷基環糊精，包括2-羥基丙基-環糊精及3-羥基丙基-環糊精)或其他溶解之衍生物亦宜用於增強本文所述式之化合物的傳遞。
    本發明之醫藥活性化合物可根據習知藥學方法加工以產生用於向患者(包括人類及其他哺乳動物)投與之醫藥藥劑。醫藥組合物可經受習知醫藥操作(諸如殺菌)及/或可含有習知佐劑，諸如防腐劑、穩定劑、濕潤劑、乳化劑、緩衝劑等。錠劑及丸劑可另外用腸溶包衣劑製備。此等組合物亦可包含佐劑，諸如濕潤劑、甜味劑、調味劑及香化劑。
    所投與之化合物之量及以本發明之化合物及/或組合物治療疾病病狀之給藥方案視多種因素而定，包括個體之年齡、體重、性別、醫學病狀、疾病類型、疾病嚴重度、投藥途徑及頻率及所採用之特定化合物。因此，給藥方案可廣泛不同，但可常規地使用標準方法來確定。每公斤體重約0.001 mg至100 mg，較佳每公斤體重約0.005 mg至約50 mg及最佳每公斤體重約0.01 mg至10 mg之日劑量可為適當的。日劑量可以每天一至四次給藥投與。
    為達治療目的，通常將本發明之活性化合物與適用於所示投藥途徑之一或多種佐劑組合。若經口投與，則可將化合物與乳糖、蔗糖、澱粉粉末、烷酸之纖維素酯、纖維素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂、氧化鎂、磷酸及硫酸之鈉鹽及鈣鹽、明膠、阿拉伯膠、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮及/或聚乙烯醇混合，接著製成錠劑或膠囊以方便投與。此等膠囊或錠劑可含有可以活性化合物於羥基丙基甲基纖維素中之分散液提供之控制釋放調配物。
    本發明之醫藥組合物包含式(I)化合物或其前藥及視情況選用之其他選自任何醫藥學上可接受之載劑、佐劑及媒劑的試劑。本發明之替代組合物包含本文所述之式(I)化合物或其前藥及醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑。 效用
    式(I)化合物適用於治療癌症，例如依賴於洛奇蛋白活化之癌症。洛奇蛋白活化涉及各種實體腫瘤(包括卵巢癌、胰臟癌以及乳癌)及血液腫瘤(諸如白血病、淋巴瘤及多發性骨髓瘤)之發病機制。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥。此實施例之方法可用於治療多種癌症，包括(但不限於)膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌(包括非小細胞肺癌(NSCLC))、卵巢癌、胰臟癌、膽囊癌、前列腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤(MFH)、纖維肉瘤、神經膠母細胞瘤/星形細胞瘤、神經母細胞瘤、黑素瘤、T細胞急性淋巴母細胞性白血病(T-ALL)及間皮瘤。舉例而言，此實施例之方法用於治療乳癌、結腸癌或胰臟癌。較佳，哺乳動物為人類。舉例而言，可在本實施例之方法中投與治療癌症之治療有效量。此實施例之方法包括投與具有以下結構之化合物：
    此實施例之方法亦包括投與具有以下結構之化合物：
    本實施例中之投藥途徑包括非經腸投與及經口投與。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥，其中該癌症為結腸直腸癌。較佳，哺乳動物為人類。舉例而言，可在本實施例之方法中投與治療癌症之治療有效量。本實施例中之投藥途徑包括非經腸投與及經口投與。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥，其中該癌症為三重陰性乳癌。較佳，哺乳動物為人類。舉例而言，可在本實施例之方法中投與治療癌症之治療有效量。本實施例中之投藥途徑包括非經腸投與及經口投與。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥，其中該癌症為非小細胞肺癌。較佳，哺乳動物為人類。舉例而言，可在本實施例之方法中投與治療癌症之治療有效量。本實施例中之投藥途徑包括非經腸投與及經口投與。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥，其中該癌症為胰臟癌。較佳，哺乳動物為人類。舉例而言，可在本實施例之方法中投與治療癌症之治療有效量。本實施例中之投藥途徑包括非經腸投與及經口投與。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥，其中該癌症為卵巢癌。較佳，哺乳動物為人類。舉例而言，可在本實施例之方法中投與治療癌症之治療有效量。本實施例中之投藥途徑包括非經腸投與及經口投與。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥，其中該癌症為黑素瘤。較佳，哺乳動物為人類。舉例而言，可在本實施例之方法中投與治療癌症之治療有效量。本實施例中之投藥途徑包括非經腸投與及經口投與。
    在一個實施例中，提供式(I)化合物或其前藥之用途，其用於製造用於治療癌症之藥物。較佳，在本實施例中，進行治療之癌症包括膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌(包括非小細胞肺癌(NSCLC))、卵巢癌、胰臟癌、膽囊癌、前列腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤(MFH)、纖維肉瘤、神經膠母細胞瘤/星形細胞瘤、神經母細胞瘤、黑素瘤、T細胞急性淋巴母細胞性白血病(T-ALL)及間皮瘤中之一或多者。本實施例之適合之藥物包括用於非經腸投與之藥物，諸如溶液及懸浮液；及用於經口投與之藥物，諸如錠劑、膠囊、溶液及懸浮液。
    一個實施例提供用於治療癌症之療法中的式(I)化合物或其前藥。在本實施例中，進行治療之癌症包括膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌(包括非小細胞肺癌(NSCLC))、卵巢癌、胰臟癌、膽囊癌、前列腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤(MFH)、纖維肉瘤、神經膠母細胞瘤/星形細胞瘤、神經母細胞瘤、黑素瘤、T細胞急性淋巴母細胞性白血病(T-ALL)及間皮瘤中之一或多者。
    在一個實施例中，提供治療哺乳動物之癌症的方法，其中該癌症依賴於洛奇蛋白活化，該方法包含投與該患者式(I)化合物或其前藥。此實施例之方法可用於治療多種癌症，包括(但不限於)膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌(包括非小細胞肺癌(NSCLC))、卵巢癌、胰臟癌、膽囊癌、前列腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤(MFH)、纖維肉瘤、神經膠母細胞瘤/星形細胞瘤、神經母細胞瘤、黑素瘤、T細胞急性淋巴母細胞性白血病(T-ALL)及間皮瘤。較佳，此實施例之方法用於治療乳癌、結腸癌或胰臟癌。較佳，哺乳動物為人類。舉例而言，可在本實施例之方法中投與治療癌症之治療有效量。適合之投藥途徑包括非經腸投與及經口投與。
    在治療癌症中，化學治療劑及/或其他治療(例如放射療法)之組合常有利。第二(或第三)藥劑之作用機制可與第一治療劑相同或不同。舉例而言，可使用藥物組合，其中所投與之兩種或兩種以上藥物以不同方式或在細胞週期之不同階段中起作用，及/或其中兩種或兩種以上藥物具有不重疊之毒性或副作用，及/或其中所組合之藥物各自在治療由患者表現之特定疾病病況方面具有證實之功效。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥；及投與一或多種其他抗癌劑。
    片語「其他抗癌劑」指選自以下任一或多者之藥物：烷基化劑(包括氮芥(nitrogen mustard)、烷基磺酸鹽、亞硝基脲、伸乙基亞胺衍生物及三氮烯)；抗血管生成劑(包括基質金屬蛋白酶抑制劑)；抗代謝物(包括腺苷脫胺酶抑制劑、葉酸拮抗劑、嘌呤類似物及嘧啶類似物)；抗生素或抗體(包括單株抗體、CTLA-4抗體、蒽環黴素(anthracycline))；芳香酶抑制劑；細胞週期反應調節劑；酶；法呢基蛋白質轉移酶抑制劑(farnesyl-protein transferase inhibitor)；激素及抗激素劑及類固醇(包括合成類似物、糖皮質激素、雌激素/抗雌激素[例如SERM]、雄激素/抗雄激素、孕酮、孕酮受體促效劑及促黃體素釋放[LHRH]促效劑及拮抗劑)；胰島素樣生長因子(IGF)/胰島素樣生長因子受體(IGFR)系統調節劑(包括IGFR1抑制劑)；整合素信號傳導抑制劑；激酶抑制劑(包括多激酶抑制劑及/或Src激酶或Src/abl抑制劑、細胞週期素依賴性激酶[CDK]抑制劑、panHer、Her-1及Her-2抗體、VEGF抑制劑(包括抗VEGF抗體)、EGFR抑制劑、有絲分裂原活化蛋白[MAP]抑制劑、MET抑制劑、MEK抑制劑、極光激酶(Aurora kinase)抑制劑、PDGF抑制劑及其他酪胺酸激酶抑制劑或絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制劑；微管破裂劑，諸如海鞘素或其類似物及衍生物；微管穩定劑，諸如紫杉烷(taxane)及天然存在之埃坡黴素(epothilone)以及其合成及半合成類似物；微管結合、去穩定劑(包括長春花生物鹼)；拓撲異構酶抑制劑；異戊二烯基-蛋白質轉移酶抑制劑；鉑配位錯合物；信號轉導抑制劑；及其他用作抗癌劑及細胞毒性劑之藥劑，諸如生物反應調節物、生長因子及免疫調節劑。
    因此，本發明化合物可與其他適用於治療癌症或其他增殖性疾病之抗癌治療組合投與。本發明在本文中進一步包含式(I)化合物或其前藥的用途，其用於製備用於治療癌症之藥物，及/或本發明包含本文中之式(I)化合物連同關於該化合物與其他抗癌劑或細胞毒性劑及用於治療癌症之治療組合使用的說明書一起的封裝。本發明進一步包含式(I)化合物與一或多種其他藥劑之呈套組形式之組合，例如其中式(I)化合物與一或多種其他藥劑封裝在一起或置放於各別封裝中以便一起以套組形式出售，或其中式(I)化合物與一或多種其他藥劑經封裝以一起調配。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥；投與達沙替尼(dasatinib)；及視情況投與一或多種其他抗癌劑。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥；投與太平洋紫杉醇(paclitaxel)；及視情況投與一或多種其他抗癌劑。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥；投與他莫西芬(Tamoxifen)；及視情況投與一或多種其他抗癌劑。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥；投與糖皮質激素；及視情況投與一或多種其他抗癌劑。合適之糖皮質激素實例為地塞米松(dexamethasone)。
    在一個實施例中，提供治療癌症之方法，其包括為有需要之哺乳動物投與式(I)化合物或其前藥；投與卡鉑(carboplatin)；及視情況投與一或多種其他抗癌劑。
    本發明化合物可與針對與上述病狀有關之副作用的特定適用性而選用之其他治療劑一起調配或共投與。舉例而言，本發明化合物可與防止噁心、過敏及胃刺激之藥劑一起調配，諸如止吐藥及H1及H2抗組織胺劑。
    在一個實施例中，提供醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其前藥；一或多種選自以下之其他藥劑：激酶抑制劑(小分子、多肽及抗體)、免疫抑制劑、抗癌劑、抗病毒劑、消炎劑、抗真菌劑、抗生素或抗血管過度增殖化合物；及任何醫藥學上可接受之載劑、佐劑或媒劑。
    上述其他治療劑在與本發明化合物組合使用時，可例如依醫師參考手冊(Physicians' Desk Reference，PDR)中所指示或如由一般技術者，以其他方式所確定之量使用。在本發明方法中，可在投與本發明化合物之前、同時或之後投與該(等)其他治療劑。
    然而，用於任何特定個體之特定劑量及給藥頻率可不同且一般視多種因素而定，包括(但不限於)例如所投與形式之特定式(I)化合物的生物可用率、特定式(I)化合物之代謝穩定性及作用時間、個體之物種、體重、一般健康、性別、飲食、投藥方式及時間、排泄速率、藥物組合及特定病狀之嚴重度。舉例而言，每公斤體重約0.001 mg至100 mg，較佳每公斤體重約0.005 mg至約50 mg及最佳每公斤體重約0.01 mg至10 mg之日劑量可為適當的。日劑量可以每天一至四次給藥投與。
    投藥可為連續的(亦即每日投與)或間歇進行。如本文所用之術語「間歇的」或「間歇地」意謂以有規則時間間隔或無規則時間間隔停止及開始。舉例而言，間歇投藥包括每週投藥1至6天；以循環形式投藥(例如連續2至8週每日投藥，繼之以達一週不投藥之中止期)；或隔日投藥。
    在一個實施例中，式(I)化合物每天一或多次連續地投與有需要之患者。舉例而言，每天一或多次投與有需要之患者治療有效量之式(I)化合物並維持連續數天。
    在一個實施例中，式(I)化合物每天一或多次間歇地投與有需要之患者。舉例而言，根據間歇時程每天一或多次投與有需要之患者治療有效量之式(I)化合物。
    在一個實施例中，式(I)化合物每天一或多次投與有需要之患者並維持連續數天，繼而一或多天不投藥。較佳，投與治療有效量之式(I)化合物。具有藥物間歇期之連續給藥的實例為以下循環：治療7天，繼而7天不治療；治療14天，繼而7天不治療；及治療7天，繼而14天不治療。治療/不治療之循環可根據治療患者的需要重複多次。
    在一個實施例中，根據間歇給藥時程，投與有需要之患者式(I)化合物。間歇給藥時程為重複時程，其包括投與患者式(I)化合物數天以及不投與患者式(I)化合物數天。間歇給藥時程之實例為：每週給藥四天並維持連續三週，繼而一週不給藥，且按四週時間間隔重複；每週給藥五天並維持連續兩週，繼而一週不給藥，且按三週時間間隔重複；及每週給藥四天並維持一週，繼而兩週不給藥，且按三週時間間隔重複。較佳，投與治療有效量之式(I)化合物。
    在一個實施例中，在某一天投與式(I)化合物，繼而中止6天，且按每週時程重複。
    在一個實施例中，連續兩天投與式(I)化合物，繼而中止5天，且按每週時程重複。
    在一個實施例中，連續三天投與式(I)化合物，繼而中止四天，且按每週時程重複。
    在一個實施例中，在某一天投與式(I)化合物，繼而中止10至13天。 製備方法
    可以熟習有機合成技術者熟知之多種方式製備本發明化合物。本發明化合物可使用下文所述之方法，以及合成有機化學之技術中已知之合成方法，或如熟習此項技術者所瞭解之其變體來合成。較佳方法包括(但不限於)下文所述之方法。本文引用之所有參考文獻以全文引用之方式併入本文中。
    本發明之化合物可使用本章節所述之反應及技術來製備。反應係在適於所採用之試劑及物質之溶劑中進行且適於所達成之轉化。同樣，在下文所述之對合成方法之描述中，應瞭解所有建議之反應條件，包括溶劑之選擇、反應氛圍、反應溫度、實驗持續時間及處理程序係選擇為該反應之標準條件，其應由熟習此項技術者輕易地識別。熟習有機合成技術者應瞭解，存在於分子之各種部分上之官能基須與所建議之試劑及反應相容。該等對與反應條件相容之取代基的限制對熟習此項技術者而言應顯而易知且因而須使用替代方法。此有時需要判斷修改合成步驟順序或選擇一個特定方法流程而非另一個以獲得所需之本發明化合物。亦應瞭解，此領域中設計任一合成途徑之另一主要考慮事項為正確選擇用於保護本發明中所述化合物中存在的反應性官能基之保護基。向經專門訓練之專業人員描述許多替代方案之權威性說明為Greene等人(Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，Wiley and Sons(1999))。
    可藉由參考以下流程中所說明之方法來製備式(I)化合物。如其中所示，最終產物為與式(I)具有相同結構式的化合物。應瞭解，任何式(I)化合物均可由該等流程藉由適當選擇具有適當取代之試劑來製備。溶劑、溫度、壓力及其他反應條件可由一般技術者輕易地選擇。起始物質為市售的或由一般技術者輕易地製備。化合物之組分係如此處或說明書中別處所定義。
    可使用流程1至5中所概述之方法來合成式(I)化合物。
    可以熟習此項技術者所知之多種方法來製備苯并二氮呯酮(iv)。舉例而言，如流程1所示，可根據文獻中所概述之程序(例如Sherrill,R.G.等人，J.Org.Chem.,60：730(1995)；或熟習此項技術者所知之其他途徑)使經適當取代之2-胺基二苯酮(i)(例如來自Walsh,D.A.,Synthesis,677(1980)；及其中引用之參考文獻，或熟習此項技術者所知之其他方法)偶合至經保護之甘胺酸衍生物(ii)(PG=保護基，例如PG=CBz，參見Katritzky,A.R.,J.Org.Chem.,55：2206-2214(1990))，用諸如氨之試劑處理，且進行環化，得到苯并二氮呯酮(iii)。所得外消旋混合物可分離(使用熟習此項技術者所知之程序)得到個別對映異構體，或以外消旋物形式使用。並且，若R3=H，則可例如用諸如MeI之試劑及諸如K2CO3之鹼在諸如DMF之溶劑中處理(iii)以製備R3=Me。
    步驟2：可以熟習此項技術者所知之若干方式來脫除(iii)之保護基。舉例而言，在PG=CBz的情況下，可用諸如HBr之試劑在諸如AcOH之溶劑中處理化合物(iii)。化合物(iv)可以外消旋物形式使用。或者，可使用標準方法(例如對掌性製備型層析)對化合物(iv)進行對映異構解析。

    步驟1：藉由使用熟習此項技術者所知之多種方式中之一者，諸如在諸如醚合三氟化硼之試劑存在下，於適當溫度下，在諸如THF之溶劑中用經取代之乙醯亞胺酯(諸如化合物(vi))處理，使化合物(v)轉化成酯(vii)來完成流程2之第一步驟。
    步驟2：可以熟習此項技術者所知之多種方式使酸(viii)轉化成化合物(ix)。舉例而言，在諸如DCM之溶劑中用諸如乙二醯氯之試劑處理酸(viii)，得到酸氯化物(ix)。可在標準條件下用噁唑啶酮(x)處理化合物(ix)，得到化合物(xi)(Evans,D.A.等人，J.Am.Chem Soc.,112：4011(1990))。
    步驟3：可以多種方式使化合物(xi)轉化成化合物(xii)(Baran,P.等人，J.Am.Chem.Spc.,130(34)：11546(2008))。舉例而言，在諸如甲苯之溶劑中，在諸如-78℃之低溫下，於諸如N2之惰性氛圍下用諸如LDA之鹼處理化合物(vii)。將所得混合物添加至在諸如N2之惰性氛圍下於諸如甲苯之溶劑中用氯化鋰及諸如LDA之鹼處理的化合物(xi)之溶液中。在諸如-78℃之低溫下，於諸如N2之惰性氛圍下向化合物(vii)及(xi)之烯醇化物之所得混合物中添加化合物，諸如雙(2-乙基己醯氧基)銅，且升溫至室溫，得到化合物(xii)。
    步驟4：可藉由在適當溫度下，使用諸如THF/水之溶劑混合物，用諸如過氧化氫及氫氧化鋰之試劑處理化合物(xii)來使其轉化成化合物(xiii)。必要時，在此時可經由矽膠層析或製備型HPLC分離非對映異構體。或者，可使混合物經受差向異構化條件，例如藉由用LDA及氯化二乙基鋁處理，繼而用甲醇或乙酸淬滅，以增濃所要的非對映異構體。
    步驟5：可在諸如TBTU之偶合試劑及諸如TEA之鹼存在下，在諸如DMF之溶劑中使化合物(xiii)與苯并二氮呯酮(iv)偶合，得到化合物(xiv)。
    步驟6：在諸如0℃之適當溫度下，於諸如DCM之溶劑中用諸如TFA之酸處理化合物(xiv)，得到化合物(xv)。
    步驟7：可經由使化合物(xv)與適當胺來源(諸如氯化銨、碳化二亞胺(諸如EDC)、HOBT及鹼(諸如TEA))在諸如DMF之溶劑中偶合來使化合物(xv)轉化成化合物(xvi)。必要時，可使用適當分離技術(諸如對掌性製備型層析)來分離非對映異構混合物。
    步驟1：亦可藉由使含有諸如氯之鹵素原子(X=Cl)及保護基(PG)(諸如Boc)之苯并二氮呯酮(xvii)與適當偶合搭配物(諸如酸)在熟習此項技術者所知之條件下交叉偶合來製備苯并二氮呯酮(iii)。舉例而言，在催化劑(諸如肆(三苯基膦)鈀(0))、諸如碳酸鈉之鹼及諸如DME之溶劑存在下，於諸如N2之惰性氛圍下使含鹵素部分與酸偶合。
    步驟1：流程4之第一步驟涉及在諸如DCC之碳化二亞胺、諸如TEA之鹼及諸如DMAP之催化劑存在下，於諸如DCM之溶劑中用羧酸(xix)處理化合物(xvii)，得到化合物(xx)。
    步驟2：可藉由在諸如HCl之酸存在下，於可為惰性之氛圍條件下(例如在N2下)用諸如氰基硼氫化鈉之試劑處理來使化合物(xx)轉化成化合物(xxi)。
    步驟3：可經由帶有適當離去基(LG)之化合物(xxii)使化合物(xxi)轉化成化合物(xxiii)。舉例而言，在適當溫度(諸如-78℃)下，於諸如DCM之溶劑中，用鹼(諸如2,6-二甲基吡啶)及諸如三氟甲烷磺酸酐之試劑處理化合物(xxi)，得到化合物(xxii)之三氟甲磺酸酯。現可使化合物(xxii)經受交叉偶合反應條件，得到化合物(xxiii)。舉例而言，在催化劑(諸如肆(三苯基膦)鈀(0))、諸如磷酸鉀之鹼存在下，於諸如二噁烷之溶劑中，在可為惰性之氛圍條件下(例如在N2下)用經適當取代之偶合搭配物(例如酸)處理化合物(xxii)，得到化合物(xxiii)。
    步驟4：可經由熟習此項技術者所知之標準程序使化合物(xxiii)轉化成化合物(xxiv)。舉例而言，在催化劑(諸如Pd/C)存在下，於諸如甲醇之溶劑中處理化合物(xxiii)，得到化合物(xxiv)。
    步驟5：可藉由使化合物(xxiv)與化合物(iv)偶合得到化合物(xxv)。舉例而言，可在諸如DCM之溶劑中，於諸如N2之惰性氛圍下藉由使用諸如AlMe3之試劑完成轉化。在此情況下，所得之非對映異構體混合物可以混合物形式使用或可藉由適當方法(諸如對掌性層析)分離。
    步驟6：在諸如丙酮之溶劑中，使用諸如瓊斯試劑(Jones reagent)之氧化劑來氧化化合物(xxv)，得到化合物(xxvi)。若化合物為非對映異構混合物，則其可以混合物形式使用或可使用適當方法(諸如對掌性層析)分離。
    步驟7：可經由熟習此項技術者所知之標準程序使化合物(xxvi)轉化成化合物(xxvii)。舉例而言，在諸如DMF之溶劑中，使化合物(xxvi)與適當胺來源(諸如氯化銨、碳化二亞胺(諸如EDC)、HOBT及鹼(諸如TEA))偶合，得到化合物(xxvii)。在此情況下，化合物可為對映純化合物或必要時，可使用適當分離技術(諸如對掌性層析)分離非對映異構混合物。

    步驟1：藉由在諸如H2SO4之酸及諸如水之溶劑中用諸如亞硝酸鈉之試劑處理化合物(xxviii)，得到化合物xxix來完成流程5之第一步驟。
    步驟2：使酸(xxix)轉化成化合物(xxx)(PG=保護基)。舉例而言，在諸如甲苯之溶劑及諸如H2SO4之酸中，用諸如苯甲醇之醇處理酸(xxix)，得到化合物xxx。
    步驟3：可藉由在諸如DCM之溶劑中，於適當溫度下用諸如2,6-二甲基吡啶之鹼及諸如三氟甲烷磺酸酐之試劑處理化合物(xxx)來製備帶有適合離去基之化合物(xxxi)。
    步驟4：可以熟習此項技術者所知之多種方式使化合物(xxxii)轉化成化合物(xxxiv)。舉例而言，可用噁唑啶酮(xxxiii)在標準條件下處理由相應羧酸與諸如乙二醯氯之試劑在諸如DCM之溶劑中製備或市售得到之酸氯化物(xxxii)，得到化合物(xxxiv)(Evans,D.A等人，J.Am.Chem Soc.,112：4011(1990))。
    步驟5：可藉由在諸如THF之溶劑中，在諸如-78℃之適當溫度下用諸如LiHMDS之鹼處理化合物(xxxiv)且向所得混合物中添加於溶劑(諸如THF)中之化合物(xxxi)來製備化合物(xxxv)。
    步驟6：可經由熟習此項技術者所知之許多方法移除化合物(xxxv)之保護基。舉例而言，可藉由在諸如甲醇之溶劑中，使用鈀催化劑(諸如玻爾曼催化劑(Pearlman's Catalyst))使其經受氫化條件來移除苯甲基，得到化合物(xxxvi)。
    步驟7：在諸如DMF之溶劑中，在諸如TBTU之偶合試劑及諸如TEA之鹼存在下使化合物(iv)與化合物(xxxvi)偶合，得到化合物(xxxvii)。必要時，可使用適當方法(諸如對掌性製備型層析)分離非對映異構體。
    步驟8：可藉由在適當溫度下，使用諸如THF/水之溶劑混合物，用過氧化氫及氫氧化鋰處理化合物(xxxvii)來使其水解，得到化合物(xv)。必要時，可使用適當方法(諸如對掌性製備型層析)分離非對映異構體。
    亦可由化合物(xi)藉由流程6中所概述之合成序列來製備流程2中之化合物(xiii)。
    步驟1：藉由在諸如THF之溶劑中，在諸如-78℃之低溫下，於惰性氛圍下用鹼(諸如雙(三甲基矽烷基)胺化鈉)處理化合物(xi)來完成流程6之第一步驟。用諸如溴乙酸第三丁酯之試劑處理所得之(xi)烯醇化物，得到化合物(xxxviii)。
    步驟2：可藉由在適當溫度下，使用諸如THF/水之溶劑混合物，用諸如過氧化氫及氫氧化鋰之試劑處理化合物(xxxviii)來使化合物(xxxviii)轉化成化合物(xxxix)。
    步驟3：可藉由在諸如THF之溶劑中，於諸如-78℃之低溫下，在惰性氛圍下用諸如LDA之鹼產生(xxxix)之烯醇化物且進一步用帶有適當離去基(例如LG=三氟甲磺酸酯基)之試劑(R2-LG)處理來使化合物(xxxix)轉化成化合物(xiii)。 實例
    本發明在以下實例中進一步定義。應瞭解，實例僅以說明之方式給出。自上述論述及實例，熟習此項技術者可確定本發明之基本特徵，且在不背離本發明精神及範疇的情況下，可作出各種變化及修改以使本發明適用於各種用途及情況。因而，本發明不受下文闡述之說明性實例限制，而由其隨附之申請專利範圍定義。 縮寫
    實例1
    (2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺
    製備物1A：5,5,5-三氟戊酸第三丁酯
    在0℃下向5,5,5-三氟戊酸(5 g，32.0 mmol)於THF(30 mL)及己烷(30 mL)中之經攪拌溶液中添加2,2,2-三氯乙醯亞胺第三丁酯(11.46 mL，64.1 mmol)。在0℃下攪拌混合物15分鐘。添加醚合三氟化硼(0.406 mL，3.20 mmol)且使反應混合物升溫至室溫隔夜。向澄清反應混合物中添加固體NaHCO3(5 g)且攪拌30分鐘。經MgSO4過濾混合物且用己烷(200 mL)洗滌。使溶液靜置45分鐘，且再藉由經相同MgSO4過濾器過濾移出所得固體物質，用己烷(100 mL)洗滌且在不加熱下減壓濃縮。將體積縮減至約30 mL，經乾淨燒結漏斗過濾，用己烷(5 mL)洗滌，接著在不加熱下減壓濃縮。經0.45 μm耐綸(nylon)膜過濾片過濾所得純油狀物，得到呈無色油狀之5,5,5-三氟戊酸第三丁酯(6.6 g，31.4 mmol，產率98%)：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 1.38(s,9 H)1.74-1.83(m,2 H)2.00-2.13(m,2 H)2.24(t,J=7.28 Hz,2 H)。
    製備物1B：(4S)-4-(丙-2-基)-3-(5,5,5-三氟戊醯基)-1,3-噁唑啶-2-酮
    經5分鐘向5,5,5-三氟戊酸(5.04 g，32.3 mmol)於DCM(50 mL)及DMF(3滴)中之經攪拌溶液中逐滴添加乙二醯氯(3.4 mL，38.8 mmol)，且攪拌溶液直至所有鼓泡平息為止。減壓濃縮反應混合物，得到淺黃色油狀物。在-78℃下向裝有(4S)-4-(丙-2-基)-1,3-噁唑啶-2-酮(4.18 g，32.4 mmol)於THF(100 mL)中之溶液的單獨燒瓶中經由注射器經5分鐘逐滴添加n-BuLi(2.5 M己烷溶液)(13.0 mL，32.5 mmol)。攪拌10分鐘後，經由套管經15分鐘添加溶解於THF(20 mL)中之上述酸氯化物。使反應混合物升溫至0℃，且在使浴槽升溫的同時，使其升溫至室溫，且攪拌隔夜。向反應混合物中添加飽和NH4Cl，接著用EtOAc(2×)萃取。用鹽水洗滌合併之有機物，乾燥(Na2SO4)，過濾且減壓濃縮。藉由急驟層析(Teledyne ISCO CombiFlash Rf，5%至60%溶劑A/B=己烷/EtOAc，REDISEP® SiO2 120 g)純化粗物質。濃縮適當溶離份，得到呈無色油狀之製備物1B(7.39 g，86%)：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 4.44(1 H,dt,J=8.31,3.53 Hz),4.30(1 H,t,J=8.69 Hz),4.23(1 H,dd,J=9.06,3.02 Hz),2.98-3.08(2 H,m),2.32-2.44(1 H,m,J=13.91,7.02,7.02,4.03 Hz),2.13-2.25(2 H,m),1.88-2.00(2 H,m),0.93(3 H,d,J=7.05 Hz),0.88(3 H,d,J=6.80 Hz)。
    製備物1C：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-((S)-4-異丙基-2-側氧基噁唑啶-3-羰基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸第三丁酯，及製備物1D：(2R,3R)-6,6,6-三氟-3-((S)-4-異丙基-2-側氧基噁唑啶-3-羰基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸第三丁酯
    在氮氣氛圍下向二異丙胺(5.3 mL，37.2 mmol)於THF(59 mL)中之經攪拌冷(-78℃)溶液中添加n-BuLi(2.5 M己烷溶液)(14.7 mL，36.8 mmol)，接著升溫至0℃，得到0.5 M LDA溶液。向單獨容器中裝入製備物1B(2.45 g，9.17 mmol)，使該物質與苯共沸兩次(旋轉蒸發器空氣入口配備有氮氣入口以完全排除濕氣)，接著添加甲苯(15.3 mL)。將此溶液添加至含有乾燥氯化鋰(1.96 g，46.2 mmol)之燒瓶中。向冷卻至-78℃之所得混合物中添加LDA溶液(21.0 mL，10.5 mmol)且在-78℃下攪拌10分鐘，升溫至0℃並維持10分鐘，接著再冷卻至-78℃。向含有亦與苯共沸兩次之製備物1A(3.41 g，16.07 mmol)之單獨反應容器中添加甲苯(15.3 mL)，冷卻至-78℃且添加LDA(37.0 mL，18.5 mmol)，在-78℃下攪拌所得溶液25分鐘。此時，將衍生自酯之烯醇化物經由套管轉移至噁唑啶酮烯醇化物之溶液中，在-78℃下再攪拌5分鐘，此時移除隔片且將固體粉末狀雙(2-乙基己醯氧基)銅(9.02 g，25.8 mmol)快速添加至反應容器中且把隔片放回原處。立即將容器自冷浴槽中移出且在快速渦旋下浸漬於溫水浴槽(40℃)中，伴隨有顏色自初始青綠色變成棕色。攪拌反應混合物20分鐘，將其傾入5% NH4OH水溶液(360 mL)中且用EtOAc(2×)萃取。用鹽水洗滌合併之有機物，乾燥(Na2SO4)，過濾且減壓濃縮。藉由急驟層析(Teledyne ISCO CombiFlash Rf，0%至60%溶劑A/B=己烷/EtOAc，REDISEP® SiO2 120 g)純化殘餘物。濃縮適當溶離份，得到呈淺黃色黏性油狀之製備物1C(2.87 g，66%)。1H NMR展示產物為非對映異構體1C：1D之1.6：1混合物，如由在2.74 ppm及2.84 ppm處之多重峰的積分所確定：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 4.43-4.54(2 H,m),4.23-4.35(5 H,m),4.01(1 H,ddd,J=9.54,6.27,3.51 Hz),2.84(1 H,ddd,J=9.41,7.28,3.64 Hz),2.74(1 H,ddd,J=10.29,6.27,4.02 Hz),2.37-2.48(2 H,m,J=10.38,6.98,6.98,3.51,3.51 Hz),2.20-2.37(3 H,m),1.92-2.20(8 H,m),1.64-1.91(5 H,m),1.47(18 H,s),0.88-0.98(12 H,m)。
    製備物1E：(2R,3S)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸，及製備物1F：(2R,3R)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸
    向製備物1C及1D(4.54 g，9.51 mmol)於THF(140 mL)及水(42 mL)中之經攪拌冷(0℃)溶液中依序添加過氧化氫(30%水溶液)(10.3 g，91 mmol)及LiOH(685.3 mg，28.6 mmol)，且攪拌混合物1小時。此時，將反應容器自冷浴槽中移出，接著攪拌1.5小時。藉由HPLC判定反應完成。向反應混合物中添加飽和NaHCO3(45 mL)及飽和Na2SO3(15 mL)，接著部分減壓濃縮。用DCM(3×)萃取所得粗溶液。用1 N HCl將水相酸化至pH約1-2，用DCM(3×)及EtOAc(1×)萃取。用鹽水洗滌合併之有機物，乾燥(Na2SO4)，過濾且減壓濃縮，得到呈無色油狀之製備物1E與1F之混合物(3.00 g，86%)：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 2.76-2.84(1 H,m，非對映異構體2),2.64-2.76(3 H,m),2.04-2.35(8 H,m),1.88-2.00(4 H,m),1.71-1.83(4 H,m),1.48(9 H,s，非對映異構體1),1.46(9 H,s，非對映異構體2)；1H NMR藉由第三丁基之峰的積分展示1E：1F之1.7：1混合物。
    製備物1E：(2R,3S)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸，及製備物1F：(2R,3R)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸
    在氮氣氛圍下向二異丙胺(1.7 mL，11.93 mmol)於THF(19 mL)中之經攪拌冷(-78℃)溶液中添加n-BuLi(2.5 M己烷溶液)(4.8 mL，12.00 mmol)。攪拌混合物5分鐘，接著升溫至0℃。在單獨容器中，經由套管向製備物1E與1F之混合物(1.99 g，5.43 mmol)於THF(18 mL)中之經攪拌冷(-78℃)溶液中經25分鐘緩慢添加上文所製備之LDA溶液。攪拌混合物15分鐘，接著升溫至室溫(置放於24℃水浴槽中)並維持15分鐘，接著再冷卻至-78℃並維持15分鐘。向反應混合物中經由注射器添加Et2AlCl(1 M己烷溶液)(11.4 mL，11.40 mmol)，攪拌10分鐘，升溫至室溫並維持15分鐘，接著冷卻回到-78℃並維持15分鐘。快速添加甲醇(25 mL)，劇烈渦旋，同時升溫至室溫，接著濃縮至約1/4原始體積。將混合物溶解於EtOAc中且用1 N HCl(50 mL)及冰(75 g)洗滌。分離水相，用EtOAc(2×)萃取。用KF(2.85 g於75 mL水中)與1 N HCl(13 mL)之混合物洗滌合併之有機物[所得溶液pH值為3-4]，接著用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且減壓濃縮，得到呈淺黃色黏性油狀之製備物1E與製備物1F之9：1(1E：1F)增濃之非對映異構混合物(如由1H NMR所測定)(2.13 g，>99%)：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 2.64-2.76(2 H,m),2.04-2.35(4 H,m),1.88-2.00(2 H,m),1.71-1.83(2 H,m),1.48(9 H,s)。
    製備物1G：(3S)-3-胺基-1-甲基-5-苯基-1,3-二氫-2H-1,4-苯并二氮呯-2-酮，及製備物1H：(3R)-3-胺基-1-甲基-5-苯基-1,3-二氫-2H-1,4-苯并二氮呯-2-酮
    根據文獻程序製備外消旋3-胺基-1-甲基-5-苯基-1,3-二氫-2H-1,4-苯并二氮呯-2-酮(Rittle,K.E.等人，Tetrahedron Letters,28(5)：521-522(1987))。在對掌性-SFC條件下，使用以下方法分離對映異構體：CHIRALPAK® AS-H 5×25；移動相：含30% MeOH+0.1% DEA之CO2；流速：280毫升/分鐘；壓力：100巴；溫度：35℃。
    得到S-對映異構體(製備物1G)：HPLC：RT=1.75分鐘(含30% MeOH+0.1% DEA之CO2，CHIRALPAK® AS-H 4.6×250 mm，3毫升/分鐘，35℃，100巴，230 nm，10 μl進樣)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 7.58-7.63(2 H,m),7.55(1 H,ddd,J=8.50,7.11,1.76 Hz),7.40-7.47(1 H,m),7.34-7.40(3 H,m),7.31(1 H,dd,J=7.81,1.51 Hz),7.14-7.22(1 H,m),4.46(1 H,s),3.44(3 H,s),3.42(2 H,s)；[α]D=-155°(c=1.9,MeOH)(Lit.Rittle,K.E.等人，Tetrahedron Letters,28(5)：521-522(1987)：[α]D=-236°)。
    亦得到R-對映異構體(製備物1H)：HPLC：RT=1.71分鐘；[α]D=+165°(c=2.1,MeOH)(Lit[α]D=+227°)。
    製備製備物1G之替代程序：
    製備物1G．CSA鹽：(3S)-3-胺基-1-甲基-5-苯基-1,3-二氫-2H-1,4-苯并二氮呯-2-酮(1S)-(+)-10-樟腦磺酸鹽
    根據文獻程序(Reider,P.J.等人，J.Org.Chem.,52：955-957(1987))自外消旋3-胺基-1-甲基-5-苯基-1,3-二氫-2H-1,4-苯并二氮呯-2-酮(9.98 g，37.6 mmol)(根據如上所示之文獻製備)製備製備物1G．CSA。得到呈無色固體狀之製備物1G．CSA(16.91 g，99%)：旋光度：[α]D=-26.99°(c=1,H2O)(Lit.[α]D=-27.8°(c=1,H2O))。
    製備物1I：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸第三丁酯，及製備物1J：(2R,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸第三丁酯
    向製備物1G(1.45 g，5.47 mmol)及製備物1E與1F之9：1混合物(1.989 g，5.43 mmol)於DMF(19 mL)中之經攪拌溶液中添加四氟硼酸O-苯并三唑-1-基-N,N,N',N'-四甲基(1.79 g，5.57 mmol)及三乙胺(3.0 mL，21.52 mmol)且攪拌隔夜。藉由LCMS判定反應完成。將反應混合物傾入水(125 mL)中且藉由過濾收集沈澱之固體，用水洗滌且空氣乾燥，得到呈奶白色固體狀之製備物1I與製備物1J之8：1混合物(2.95 g，89%)：MS(ES)：m/z=614[M+H]+；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 7.55-7.65(3 H,m),7.44-7.52(2 H,m),7.35-7.45(4 H,m),5.52(1 H,d,J=8.03 Hz),3.48(3 H,s),2.63(2 H,ddd,J=9.35,3.95,3.76 Hz),2.14-2.25(4 H,m),1.90-2.03(3 H,m),1.69-1.82(1 H,m),1.51(9 H,s)。
    製備物1K：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸，及製備物1L：(2R,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸
    向製備物1I與製備物1J之上述混合物(2.95 g，4.81 mmol)於DCM(20 mL)中之經攪拌冷(0℃)溶液中添加TFA(20 mL，260 mmol)。攪拌反應混合物1小時，接著升溫至室溫且攪拌2.5小時。藉由LCMS判定反應完成。用甲苯(50 mL)稀釋反應混合物且減壓濃縮。將殘餘物混合物再溶解於甲苯(50 mL)中且減壓濃縮，接著在高真空下乾燥。將粗產物溶解於DCM中，添加SiO2(15 g)，濃縮，接著藉由急驟層析(Teledyne ISCO CombiFlash Rf，0%至45%溶劑A/B=DCM/EtOAc，REDISEP® SiO2 80 g)純化。濃縮適當溶離份，得到呈奶白色固體狀之製備物1K與製備物1L之混合物(2.00 g，75%)：HPLC：RT=2.770分鐘(CHROMOLITH® SpeedROD 4.6×50 mm(4分鐘梯度)，用含有0.1% TFA之10%至90% MeOH水溶液經4分鐘溶離，4毫升/分鐘，在254 nm下監測)；MS(ES)：m/z=558[M+H]+；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 8.32(1 H,d,J=8.03 Hz),7.65-7.71(1 H,m),7.50-7.60(3 H,m),7.41-7.49(2 H,m),7.39(1 H,dd,J=7.91,1.63 Hz),7.23-7.35(2 H,m),5.59(1 H,d,J=8.03 Hz),3.51(3 H,s),2.81(1 H,ddd,J=10.54,6.90,3.64 Hz),2.67-2.76(1 H,m),2.22-2.33(3 H,m),1.99-2.12(3 H,m),1.85-1.94(1 H,m),1.79(1 H,ddd,J=13.87,7.84,3.64 Hz)。
    實例1：
    在氮氣氛圍下向製備物1K與製備物1L之8：1混合物(3.46 g，6.21 mmol)於DMF(25 mL)中之經攪拌溶液中添加氯化銨(3.32 g，62.1 mmol)、EDC(3.55 g，18.52 mmol)、HOBT(2.85 g，18.61 mmol)及三乙胺(16 mL，115 mmol)且攪拌隔夜。藉由LCMS判定反應完成。在劇烈渦旋下將反應混合物傾入水(200 mL)中，接著靜置。藉由過濾收集固體，用水洗滌，乾燥，得到3.6 g無色固體。藉由製備型SFC層析(Lux-Cellulose-2(3×25 cm)，含8%甲醇之CO2，140毫升/分鐘，在220 nm及35℃下；樣品：3.6 g於50 cc甲醇中，濃度=70 mg/ml，重迭進樣(Stack injection)：0.5 cc/9.2 min)純化固體。濃縮含有產物之溶離份，在真空下乾燥隔夜。得到呈無色固體狀之實例1(2.74 g，79%)(晶體形式N-1)：HPLC：RT=9.601分鐘(含TFA之H2O/CH3CN，Sunfire C18 3.5 μm，4.6×150 mm，4.6×150 mm，梯度=15分鐘，波長=220 nm及254 nm)。MS(ES)：m/z=557[M+H]+；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 9.54(1 H,d,J=7.28 Hz),7.71-7.80(1 H,m),7.68(2 H,d,J=8.78 Hz),7.50-7.62(3 H,m),7.45(2 H,t,J=7.28 Hz),7.29-7.40(2 H,m),7.15(1 H,br.s.),5.30(1 H,d,J=7.28 Hz),3.39(3 H,s),2.74-2.86(1 H,m),2.02-2.32(3 H,m),1.45-1.79(4 H,m)；[α]D=-107.0°(5.73 mg/mL,DMSO)。
    藉由將約1 mg實例1添加至約0.7 mL丙酮/乙腈/水溶液(2：2：1)中來製備晶體形式A-2。在室溫下緩慢蒸發溶液一天後得到無色針狀晶體與薄葉片狀晶體之混合物。分離薄葉片狀晶體，得到晶體形式A-2。
    藉由將約1 mg實例1添加至約0.7 mL乙酸乙酯/庚烷溶液(1：1)中來製備晶體形式EA-3。在室溫下緩慢蒸發溶液三天後得到無色葉片狀晶體。
    藉由將約5 mg實例1添加至約0.7 mL THF/水溶液(4：1)中來獲得晶體形式THF-2。在室溫下蒸發溶劑一天後得到無色葉片樣晶體。
    製備實例1之替代程序：
    製備物1M：三氟甲烷磺酸3,3,3-三氟丙酯
    向2,6-二甲基吡啶(18.38 mL，158 mmol)於CH2Cl2(120 mL)中之經攪拌冷(-25℃)溶液中經3分鐘添加Tf2O(24.88 mL，147 mmol)且攪拌5分鐘。向反應混合物中經3分鐘之時間間隔添加3,3,3-三氟丙-1-醇(12 g，105 mmol)。2小時後，使反應混合物升溫至室溫且攪拌1小時。將反應混合物濃縮至一半體積，接著藉由直接加載於矽膠管柱(330 g ISCO)上來純化且用CH2Cl2溶離。得到呈無色油狀之製備物1M(13.74 g，53%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 4.71(2 H,t,J=6.15 Hz),2.49-2.86(2 H,m)。
    製備物1N：(4S)-4-苯甲基-3-(5,5,5-三氟戊醯基)-1,3-噁唑啶-2-酮
    藉由關於製備物1B所示之一般方法，自5,5,5-三氟戊酸(3.35 g，21.46 mmol)及(4S)-4-苯甲基-1,3-噁唑啶-2-酮(3.80 g，21.46 mmol)製備製備物1N。得到呈無色黏性油狀之製備物1N(5.67 g，84%)：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 7.32-7.39(2 H,m),7.30(1 H,d,J=7.05 Hz),7.18-7.25(2 H,m),4.64-4.74(1 H,m),4.17-4.27(2 H,m),3.31(1 H,dd,J=13.35,3.27 Hz),3.00-3.11(2 H,m),2.79(1 H,dd,J=13.35,9.57 Hz),2.16-2.28(2 H,m),1.93-2.04(2 H,m)。
    製備物1O：(3R)-3-(((4S)-4-苯甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)羰基)-6,6,6-三氟己酸第三丁酯
    在氮氣氛圍下向製備物1N(3.03 g，9.61 mmol)於THF(20 mL)中之經攪拌冷(-78℃)溶液中添加NaHMDS(1.0 M THF溶液)(10.6 mL，10.60 mmol)。2小時後，在-78℃下經由注射器添加純2-溴乙酸第三丁酯(5.62 g，28.8 mmol)且在相同溫度下維持攪拌。6小時後，使反應混合物升溫至室溫。將反應混合物分配於飽和NH4Cl與EtOAc之間。分離有機相，且用EtOAc(3×)萃取水相。用鹽水洗滌合併之有機物，乾燥(Na2SO4)，過濾且減壓濃縮。藉由急驟層析(Teledyne ISCO CombiFlash Rf，5%至100%溶劑A/B=己烷/EtOAc，REDISEP® SiO2 120 g)純化殘餘物。濃縮適當溶離份，得到呈無色黏性油狀之製備物1O(2.79 g，67.6%)：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 7.34(2 H,d,J=7.30 Hz),7.24-7.32(3 H,m),4.62-4.75(1 H,m,J=10.17,6.89,3.43,3.43 Hz),4.15-4.25(3 H,m),3.35(1 H,dd,J=13.60,3.27 Hz),2.84(1 H,dd,J=16.62,9.57 Hz),2.75(1 H,dd,J=13.35,10.07 Hz),2.47(1 H,dd,J=16.62,4.78 Hz),2.11-2.23(2 H,m),1.90-2.02(1 H,m),1.72-1.84(1 H,m),1.44(9 H,s)。
    製備物1P：(2R)-2-(2-第三丁氧基-2-側氧基乙基)-5,5,5-三氟戊酸
    藉由關於製備物1E所示之一般方法自製備物1O(2.79 g，6.50 mmol)製備製備物1P。得到呈無色油狀之製備物1P(1.45 g，83%)：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 2.83-2.95(1 H,m),2.62-2.74(1 H,m),2.45(1 H,dd,J=16.62,5.79 Hz),2.15-2.27(2 H,m),1.88-2.00(1 H,m),1.75-1.88(1 H,m),1.45(9 H,s)。
    製備物1E：(2R,3S)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸，及製備物1F：(2R,3R)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸
    向製備物1P(5.44 g，20.13 mmol)於THF(60 mL)中之經攪拌冷(-78℃)溶液中經7分鐘緩慢添加LDA(24.60 mL，44.3 mmol)。攪拌2小時後，經3分鐘將製備物1M(6.44 g，26.2 mmol)添加至反應混合物中。45分鐘後，使反應混合物升溫至-25℃浴槽(冰/MeOH/乾冰)並維持1小時，接著升溫至0℃。45分鐘後，添加製備物1M(1 g)且攪拌反應混合物20分鐘。用水及1 N NaOH淬滅反應且用CH2Cl2萃取。用1 N NaOH(2×)再萃取有機層且合併水層。在冰/水浴槽中冷卻水層，接著用濃HCl酸化至pH 2。隨後，用EtOAc萃取水層。用鹽水洗滌合併之有機物，經無水硫酸鈉乾燥，且減壓濃縮。在高真空下乾燥殘餘物，得到呈淺黃色固體狀之製備物1E與製備物1F之1：5(1E：1F)混合物(如由1H NMR)所測定)(5.925 g，80%)。1H NMR(500 MHz,CDCl3)δ ppm 2.81(1 H,ddd,J=10.17,6.32,3.85 Hz),2.63-2.76(1 H,m),2.02-2.33(4 H,m),1.86-1.99(2 H,m),1.68-1.85(2 H,m),1.47(9 H,s)。
    製備物1E：(2R,3S)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸，及製備物1F：(2R,3R)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸
    將製備物1E與製備物1F之混合物(64 mg，1.758 mmol)溶解於THF(6 mL)中，得到無色溶液，將其冷卻至-78℃。接著，將LDA(2.149 mL，3.87 mmol)(1.8 M庚烷/THF/乙苯溶液)經10分鐘緩慢添加至反應混合物中。攪拌15分鐘後，將反應混合物置放於室溫水浴槽中。15分鐘後，將反應混合物放回到-78℃浴槽中，接著經5分鐘緩慢添加氯化二乙基鋁(3.87 mL，3.87 mmol)(1 M己烷溶液)。在-78℃下攪拌反應混合物。15分鐘後，將反應混合物置放於室溫水浴槽中10分鐘，接著冷卻回到-78℃浴槽。15分鐘後，用MeOH(8 mL，198 mmol)淬滅反應，自-78℃浴槽中移出且濃縮。向反應混合物中添加冰及HCl(16 mL，16.00 mmol)，繼而用EtOAc(2×)萃取。用氟化鉀(920 mg，15.84 mmol)(於25 mL H2O中)及HCl(4.5 mL，4.50 mmol)洗滌有機層。經無水硫酸鎂乾燥有機物，且減壓濃縮，得到呈淡黃色/橙色固體狀之製備物1E與製備物1F之9：1(1E：1F)增濃混合物(540 mg，1.583 mmol，產率90%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 2.64-2.76(2 H,m),2.04-2.35(4 H,m),1.88-2.00(2 H,m),1.71-1.83(2 H,m),1.48(9 H,s)。藉由如上文所概述之反應序列使其轉化成實例1。
    製備製備物1E之替代程序：
    製備物1Q：(2R,3S)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二酸1-苯甲酯4-第三丁酯
    在室溫下向裝備有機械攪拌、溫度計座及氮氣鼓泡器之乾淨且乾燥之5 L四頸圓底燒瓶中裝入N,N-二甲基甲醯胺(2.07 L)、製備物1E與製備物1F之1.2：1混合物(207 g，0.5651 mol)、碳酸鉀(117.1 g，0.8476 mol)，繼而經15至20分鐘裝入苯甲基溴(116 g，0.6781 mol)。攪拌反應混合物2至3小時。反應完成後，在50℃至55℃下，於真空下將反應混合物濃縮至乾燥。將乙酸乙酯(3.1 L，30體積)裝入濃縮之反應物質中，接著用水(2.07 L)、鹽水(0.6 L)洗滌，接著經無水硫酸鈉(207 g)乾燥，過濾且在40℃至45℃下於真空下濃縮至乾燥。將殘餘物溶解於二氯甲烷(1.035 L，5體積)中，接著吸收至矽膠(60-120)(607 g，3.0 w/w)上，接著用管柱層析使用石油醚及乙酸乙酯作為溶劑來純化。在彙集若干批料後，得到製備物1Q(235 g)。HPLC純度：99.77%，
    製備物1E：(2R,3S)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸
    向乾淨且乾燥之2 L高壓釜中裝入甲醇(540 mL)且用氮氣吹掃5至10分鐘。向高壓釜中添加10%鈀/碳(12 g，20%)，再次用氮氣吹掃5至10分鐘，接著裝入製備物1Q(60 g，0.1315 mol)，用甲醇(60 mL)沖洗高壓釜且在20℃至25℃下於5 Kg氫氣壓力下攪拌4至6小時。反應完成後，經CELITE®過濾反應物質，用甲醇(180 mL)洗滌，用無水硫酸鈉(60 g)乾燥，過濾且在45℃至50℃下於真空下濃縮至乾燥。得到呈無色固體狀之製備物1E(45.8 g，95%)：HPLC純度：98.9%。
    製備製備物1E之替代程序：
    製備物1E：(2R,3S)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸
    以與上述相同之程序，自製備物1E與1F之混合物(200 g，0.5460 mol)，使用於THF(2.0 L)中之LDA(1.8 M THF、乙基苯及庚烷溶液)(698 mL，2.3當量)及氯化二乙基鋁(1.0 M己烷溶液)(1256 mL，2.3當量)製備製備物1E。在如上文所闡明進行處理後，如下處理所得殘餘物：將粗物質添加至2 L四頸圓底燒瓶中，繼而在30℃以下添加MTBE(1.0 L)。攪拌所得混合物5分鐘至10分鐘，得到澄清溶液。在低於30℃之溫度下將己烷(600 mL)裝入反應混合物中。攪拌反應混合物10分鐘。隨後，在30℃以下，經15分鐘時間緩慢裝入第三丁胺(43.8 g，1.1當量)。觀測到此添加為放熱的。在30℃以下攪拌反應混合物2小時且過濾。用5：3 MTBE：己烷(200 mL)洗滌固體物質，濃縮濾液且轉移至琥珀色瓶中。將過濾之固體溶解於二氯甲烷(2.0 L)中，用1 N HCl(2.0)洗滌，用鹽水(1.0 L×2)洗滌有機層，接著在45℃以下減壓濃縮。發現此物質純度為91.12%。藉由上述第三丁胺結晶純化程序再純化物質。得到製備物1E(78 g，39%)：HPLC純度：99.54%。
    製備實例1之替代程序：
    製備物1I：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸第三丁酯
    在氮氣氛圍下於20℃至25℃下向裝備有機械攪拌、溫度計座及氮氣鼓泡器之乾淨且乾燥之2 L四頸圓底燒瓶中裝入N,N-二甲基甲醯胺(457 mL)、製備物1E(45.7 g，0.1248 mol)及製備物1G．CSA(62.08 g，0.1248 mol)。在20℃至25℃下攪拌反應混合物15分鐘至20分鐘，得到澄清溶液。在20℃至25℃下向反應混合物中添加TBTU(48.16 g，0.1498 mol)，繼而在20℃至25℃下經15分鐘至20分鐘添加三乙胺(50.51 g，0.4992 mol)。在20℃至25℃下於氮氣氛圍下攪拌反應混合物60分鐘至120分鐘。反應完成後，在20℃至25℃下，於攪拌下在水(1.37 L，30體積)中淬滅反應。在20℃至25℃下攪拌反應混合物30分鐘。過濾反應混合物且用水(228 mL)洗滌。將所得固體物質溶解於乙酸乙酯(457 mL)中，用水(2×137 mL)、鹽水(137 mL)洗滌，接著用無水硫酸鈉(45.7 g)乾燥。將活性炭(9.14 g，20%)裝入反應混合物中且攪拌30分鐘。經CELITE®床及1微米過濾布過濾混合物，用乙酸乙酯(137 mL)洗滌炭床，濃縮至1.0體積級，接著裝入石油醚(457 mL，10體積)且在20℃至25℃下攪拌30分鐘。藉由過濾收集固體，用石油醚(137 mL)洗滌，接著在真空下於40℃至45℃下乾燥8小時直至乾燥損失為3.0%以下為止。得到製備物1I(65.2 g，85%)：HPLC純度：98.26%。
    製備物1K：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸
    在氮氣氛圍下向裝備有機械攪拌、溫度計座及氮氣鼓泡器之乾淨且乾燥之3 L四頸圓底燒瓶中裝入二氯甲烷(980 mL)，繼而在20℃至25℃下裝入製備物1I(140 g，0.2282 mol)。將反應混合物冷卻至0℃至5℃且緩慢裝入三氟乙酸(980 mL)歷時30分鐘至40分鐘。在氮氣氛圍下於0℃至5℃下攪拌所得混合物2小時。使反應溫度升高至20℃至25℃，且在20℃至25℃下攪拌反應混合物1小時至2小時。反應完成後，在50℃至55℃下，於真空下將反應混合物濃縮至乾燥。將甲苯(3×700 mL)裝入濃縮之反應物質中，接著在50℃至55℃下於真空下蒸餾出。在自甲苯中完全濃縮後，在20℃至25℃下將乙酸乙酯(280 mL)裝入反應物質中，攪拌60分鐘，接著藉由過濾收集固體，用乙酸乙酯(140 mL)洗滌，在真空下於50℃至55℃下乾燥12小時直至乾燥損失為2.0%以下為止。得到製備物1K(106 g，84%)：HPLC純度：98.43%。
    實例1：
    在室溫下向反應容器中裝入製備物1K(30 g，53.81 mmol)、HOBt(8.7 g，64.38 mmol)及THF(150 mL)。向均質溶液中添加EDCI(12.4 g，64.68 mmol)，攪拌15分鐘，接著冷卻至8℃。向反應混合物中經5分鐘添加氨(2 M IPA溶液)(81 mL，162 mmol)以維持溫度低於10℃。攪拌所得稠厚漿料10分鐘，經30分鐘升溫至室溫，接著攪拌4小時。在反應完成時，經15分鐘緩慢添加水(230 mL)以維持溫度低於20℃，接著攪拌2小時。藉由過濾收集固體，用水(3×60 mL)洗滌，接著在真空下於55℃下乾燥48小時。將上述粗產物裝入1 L三頸圓底燒瓶中。添加IPA(200 mL)，接著加熱至80℃，得到均質溶液。緩慢添加(15分鐘)水(170 mL)以維持內部溫度>75℃。攪拌所得漿料且冷卻至室溫並維持2小時。藉由過濾收集固體，用水(2×50 mL)洗滌，接著在真空下乾燥(在55℃下乾燥24小時，且在30℃下乾燥48小時)。得到實例1(23.4 g，產率78%)：HPLC純度：99.43%。 實例2
    (2R,3S)-N-((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺
    製備物2A：(3S)-3-胺基-5-苯基-1,3-二氫-2H-1,4-苯并二氮呯-2-酮，及製備物2B：(3R)-3-胺基-5-苯基-1,3-二氫-2H-1,4-苯并二氮呯-2-酮
    根據文獻程序製備外消旋3-胺基-5-苯基-1,3-二氫-2H-1,4-苯并二氮呯-2-酮(J.Med.Chem.,49：2311-2319(2006)，化合物#5)。經Berger SFC MGIII管柱：Lux 25×3 cm，5 cm；移動相：含30% MeOH+0.1% DEA之CO2；流速：150毫升/分鐘；溫度：40℃；偵測器波長：250 nM分離對映異構體。得到呈白色固體狀之S-對映異構體製備物2A：1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 10.67(1 H,br.s.),7.58(1 H,td,J=7.65,1.76 Hz),7.37-7.53(5 H,m),7.23-7.30(2 H,m),7.14-7.22(1 H,m),4.23(1 H,s),2.60(2 H,br.s.)；HPLC：RT=3.0625分鐘(含30% MeOH+0.1% DEA之CO2，OD-H管柱，3毫升/分鐘，35℃，96巴，230 nm，10 μl進樣)；[α]D=-208.3°(5.05 mg/mL,MeOH)。亦得到呈灰白色固體狀之R-對映異構體製備物2B：HPLC：RT=3.970分鐘；[α]D=182.1°(2.01 mg/mL,MeOH)。
    製備物2C：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸第三丁酯，及製備物2D：(2R,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸第三丁酯
    根據關於製備物1I所示之一般程序，自製備物2A(564 mg，2.244 mmol)及製備物1E與製備物1F之混合物(822 mg，2.244 mmol)製備製備物2C。得到製備物2C及製備物2D(1.31 g，97%)：HPLC：RT=3.443分鐘(CHROMOLITH® ODS 4.6×50 mm(4分鐘梯度)，用含有0.% TFA之10%至90% MeOH水溶液經4分鐘溶離，4毫升/分鐘，在220 nm下監測)；MS(ES)：m/z=600.3[M+H]+。
    製備物2E：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸，及製備物2F：(2R,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)己酸
    藉由關於製備物1K所示之一般方法，自製備物2C與製備物2D之混合物(1.31 g，2.185 mmol)製備製備物2E與製備物2F之混合物。得到製備物2E與製備物2F之混合物(1.18 g，99%)：HPLC：RT=2.885分鐘(CHROMOLITH® ODS 4.6×50 mm(4分鐘梯度)，用含有0.% TFA之10%至90% MeOH水溶液經4分鐘溶離，4毫升/分鐘，在220 nm下監測)。MS(ES)：m/z=544.2[M+H]+。
    實例2：
    藉由關於實例1所示之一般方法自製備物2E與製備物2F之混合物(354 mg，0.651 mmol)製備實例2。在分離非對映異構體後，得到呈白色固體狀之實例2(188 mg，52%)：HPLC：RT=9.063分鐘(含TFA之H2O/CH3CN，Sunfire C18 3.5 μm，4.6×150 mm，4.6×150 mm，梯度=15分鐘，波長=220 nm及254 nm)；MS(ES)：m/z=543[M+H]+；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 10.87(1 H,br.s.),9.50-9.55(1 H,m),7.62-7.69(2 H,m),7.40-7.57(5 H,m),7.29-7.36(2 H,m),7.22-7.28(1 H,m),7.16(1 H,br.s.),5.25(1 H,d),3.30-3.32(1 H,m),2.75-2.86(1 H,m),2.44-2.48(1 H,m),2.06-2.34(3 H,m),1.51-1.77(4 H,m)；[α]D=-114.4°(8.04 mg/mL,DMSO)。
    藉由將約1 mg實例2添加至約0.7 mL MeOH/氟苯溶液(3：1)中來製備晶體形式M2-1。在室溫下蒸發溶劑2天後得到無色片樣晶體。 實例3
    (2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-3-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺
    製備物3A：(4S)-4-(丙-2-基)-3-(4,4,4-三氟丁醯基)-1,3-噁唑啶-2-酮
    藉由關於製備物1B所示之一般方法，自(4S)-4-(丙-2-基)-1,3-噁唑啶-2-酮(4.66 g，36.1 mmol)及4,4,4-三氟丁酸(5.02 g，35.3 mmol)製備製備物3A。得到呈無色油狀之製備物3A(3.64 g，40%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 4.44(1 H,ddd,J=8.41,3.51,3.39 Hz),4.31(1 H,t,J=8.66 Hz),4.25(1 H,dd,J=9.03,3.26 Hz),3.13-3.32(2 H,m),2.47-2.59(2 H,m),2.38(1 H,dddd,J=13.96,7.01,3.89 Hz),0.93(3 H,d,J=7.28 Hz),0.88(3 H,d,J=6.78 Hz)。
    製備物3B：(3R)-5,5,5-三氟-3-(((4S)-2-側氧基-4-(丙-2-基)-1,3-噁唑啶-3-基)羰基)-2-(3,3,3-三氟丙基)戊酸第三丁酯
    藉由關於製備物1C所示之一般方法，自製備物3A(1.04 g，4.12 mmol)及5,5,5-三氟戊酸第三丁酯(製備物1A)(1.55 g，7.28 mmol)製備製備物3B。得到呈淺黃色黏性油狀之製備物3B(528.3 mg，28%)：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 4.57(1 H,ddd,J=10.54,5.02,1.76 Hz),4.41-4.50(2 H,m),4.20-4.32(4 H,m),2.77-2.88(3 H,m),2.70(1 H,dt,J=9.79,4.89 Hz),2.38(1 H,dddd,J=10.38,6.87,3.64,3.45 Hz),2.23-2.34(4 H,m),2.06-2.18(2 H,m),1.93-2.05(2 H,m),1.69-1.81(4 H,m),1.46(9 H,s),1.43(9 H,s),0.85-0.97(12 H,m)。
    製備物3C：(2R)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(2,2,2-三氟乙基)己酸
    藉由關於製備物1D所示之一般方法，自製備物3B(528.3 mg，1.140 mmol)製備製備物3C。得到呈無色蠟狀固體狀之製備物3C(306.7 mg，76%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 3.08(1 H,ddd,J=8.72,4.20,3.89 Hz),3.00(1 H,ddd,J=9.66,7.03,2.89 Hz),2.70-2.82(4 H,m),2.36(1 H,ddd,J=15.25,10.73,3.64 Hz),2.18-2.30(2 H,m),2.12(2 H,dd,J=10.16,5.65 Hz),1.90-2.02(2 H,m),1.70-1.81(3 H,m),1.45-1.51(18 H,m)。
    製備物3D：(2R,3S)-3-(第三丁氧羰基)-6,6,6-三氟-2-(2,2,2-三氟乙基)己酸
    藉由經展示以增濃製備物1E與製備物1F之混合物的一般方法，自製備物3C(306.7 mg，0.871 mmol)製備製備物3D。得到呈黃色蠟狀固體狀之製備物3D(297.0 mg，97%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 2.99(1 H,ddd,J=9.47,6.96,2.89 Hz),2.69-2.82(2 H,m),2.18-2.31(2 H,m),2.06-2.18(1 H,m),1.91-2.03(1 H,m),1.68-1.80(1 H,m),1.46-1.51(9 H,m)。
    製備物3E：(2S,3R)-5,5,5-三氟-3-(((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)戊酸第三丁酯
    藉由關於製備物1I所示之一般方法，自製備物3D(297.0 mg，0.843 mmol)及製備物1G(212.0 mg，0.799 mmol)製備製備物3E。得到呈棕褐色固體(471.7 mg，98%)之製備物3E(471.7 mg，98%)。MS(ES)：m/z=600[M+H]+；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 7.75(1 H,d,J=7.78 Hz),7.54-7.64(3 H,m),7.43-7.51(1 H,m),7.34-7.43(4 H,m),7.22-7.31(1 H,m),5.50(1 H,d,J=7.53 Hz),3.48(3 H,s),2.87-2.96(1 H,m),2.73-2.83(1 H,m),2.60(1 H,td,J=10.10,3.89 Hz),2.13-2.25(3 H,m),1.86-2.05(2 H,m),1.52(9 H,s)。
    製備物3F：(2S,3R)-5,5,5-三氟-3-(((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(3,3,3-三氟丙基)戊酸
    藉由關於製備物1H所示之一般方法，自製備物3E(466.1 mg，0.777 mmol)製備製備物3F。得到呈棕褐色固體狀之製備物3F(451 mg，>99%)。MS(ES)：m/z=544[M+H]+；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 8.29(1 H,d,J=7.53 Hz),7.64(1 H,td,J=7.84,1.63 Hz),7.53-7.60(2 H,m),7.49(1 H,t,J=7.40 Hz),7.33-7.46(4 H,m),7.22-7.33(2 H,m),5.53(1 H,d,J=7.53 Hz),3.49(3 H,s),3.04-3.21(2 H,m),2.69-2.81(2 H,m),2.23-2.33(2 H,m),2.07-2.19(2 H,m)。
    實例3：
    藉由關於實例1所示之一般方法，自製備物3F(446 mg，0.821 mmol)製備實例3。在分離非對映異構體後，得到實例3：HPLC：RT=3.17分鐘(含TFA之H2O/CH3CN，Sunfire C18 3.5 μm，4.6×150 mm，4.6×150 mm，梯度=15分鐘，波長=220 nm及254 nm)。MS(ES)：m/z=543.3[M+H]+；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 9.72(1 H,d,J=8.53 Hz),7.71-7.77(1 H,m),7.66-7.71(1 H,m),7.64(1 H,d,J=1.25 Hz),7.48-7.57(3 H,m),7.39-7.47(2 H,m),7.30-7.39(2 H,m),7.23(1 H,s),5.36(1 H,d,J=8.53 Hz),3.39(3 H,s),3.12-3.23(1 H,m),2.53-2.61(1 H,m),2.43(1 H,td,J=10.10,3.89 Hz),2.16-2.28(1 H,m),2.02-2.16(1 H,m),1.82-1.96(1 H,m),1.68-1.82(1 H,m)。 實例4
    (2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-3-(2,2,2-三氟乙基)-2-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺
    製備物4A：4,4,4-三氟丁酸第三丁酯
    使用關於製備物1A所示之一般程序，自4,4,4-三氟丁酸(4.99 g，35.1 mmol)製備製備物4A。得到呈無色油狀之製備物4A(5.58 g，80%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 2.47-2.52(2 H,m),2.37-2.45(2 H,m),1.46(9 H,s)。
    製備物4B：(3R)-6,6,6-三氟-3-(((4S)-2-側氧基-4-(丙-2-基)-1,3-噁唑啶-3-基)羰基)-2-(2,2,2-三氟乙基)己酸第三丁酯
    根據關於製備物1C所示之一般程序，自製備物4A(1058.3 mg，5.34 mmol)及製備物1B(809.2 mg，3.03 mmol)製備製備物4B。得到呈淺黃色黏性油狀之製備物4B(690.1 mg，49%)：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 4.45-4.52(1 H,m),4.23-4.40(1 H,m),4.05-4.12(1 H,m),3.70(1 H,t,J=6.7 Hz),3.05(1 H,ddd,J=9.9,5.0,2.3 Hz),2.99(1 H,ddd,J=11.2,5.8,1.8 Hz),2.58-2.91(2 H,m),2.38-2.49(1 H,m),2.27-2.36(1 H,m),2.07-2.26(1 H,m),1.96-2.04(1 H,m),1.85-1.94(1 H,m),1.72-1.82(1 H,m),1.46(3 H,s),0.88-0.98(3 H,m)；HPLC：RT=3.36分鐘(MeOH/H2O/0.1% TFA，CHROMOLITH® SpeedROD 4.6×50 mm，4分鐘梯度，波長=220 nm)。
    製備物4C：(2R)-3-(第三丁氧羰基)-5,5,5-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)戊酸
    根據關於製備物1E所示之一般程序，自製備物4B(690.1 mg，1.489 mmol)製備製備物4C。得到呈無色油狀之製備物4C(335.9 mg，64%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 2.91-3.03(1 H,m),2.63-2.88(2 H,m),2.50(1 H,t,J=7.3 Hz),2.07-2.43(4 H,m),1.89-2.05(2 H,m),1.73-1.88(1 H,m),1.47(5 H,s),1.47(4 H,s)。
    製備物4D：(2R,3S)-3-(第三丁氧羰基)-5,5,5-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)戊酸
    根據經展示以增濃製備物1E與製備物1F之混合物的一般程序，自製備物4C(335.9 mg，0.954 mmol)製備製備物4D。得到呈棕色油狀之製備物4D(277.8 mg，83%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 2.90-3.03(1 H,m),2.64-2.88(2 H,m),2.50(1 H,t,J=7.3 Hz),2.06-2.43(3 H,m),1.89-2.03(1 H,m),1.73-1.88(1 H,m),1.47(9 H,s)。
    製備物4E：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(2,2,2-三氟乙基)己酸第三丁酯
    根據關於製備物1I所示之一般程序，自製備物4D(277.8 mg，0.789 mmol)及製備物1G(210.2 mg，0.792 mmol)製備製備物4E。得到呈奶白色固體狀之製備物4E(420.2 mg，89%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 7.55-7.65(3 H,m),7.48(1 H,d,J=7.5 Hz),7.36-7.45(4 H,m),5.51(1 H,d,J=7.8 Hz),3.49(3 H,s),2.87-2.92(1 H,m),2.63(1 H,s),2.47-2.58(1 H,m),2.16-2.36(2 H,m),1.93-2.06(1 H,m),1.80(1 H,s),1.51(9 H,s)；LCMS：RT=4.02分鐘(MeOH/H2O/0.1% TFA，CHROMOLITH® RP-18e 2.0×50 mm，4分鐘梯度，波長=254 nm)；MS(ES)：m/z=600[M+H+]。
    製備物4F：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(2,2,2-三氟乙基)己酸
    根據關於製備物1K所示之一般程序，自製備物4E(417.2 mg，0.696 mmol)製備製備物4F。得到呈琥珀色固體狀之呈TFA溶劑合物形式之製備物4F(476.0 mg，96%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 8.25(1 H,d,J=8.0 Hz),7.73-7.82(1 H,m),7.56-7.67(2 H,m),7.34-7.54(3 H,m),5.67(1 H,d,J=8.3 Hz),3.49-3.60(2 H,m),3.05-3.13(1 H,m),2.81-2.97(1 H,m),2.39-2.60(1 H,m),2.18-2.33(1 H,m),1.95-2.13(1 H,m)；LCMS：RT=3.43分鐘(MeOH/H2O/0.1% TFA，CHROMOLITH® RP-18e 2.0×50 mm，4分鐘梯度，波長=254 nm)；MS(ES)：m/z=544[M+H+]。
    實例4：
    根據關於實例1所示之一般程序，自製備物4F(476.3 mg，0.667 mmol)製備實例4。在分離非對映異構體後，得到呈奶白固體狀之實例4(120.3 mg，32%)。HPLC：RT=9.446分鐘(含TFA之H2O/CH3CN，Sunfire C18 3.5 μm，4.6×150 mm，4.6×150 mm，梯度=15分鐘，波長=220 nm及254 nm)；MS(ES)：m/z=543[M+H+]；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 9.56(1 H,d,J=7.03 Hz),7.82(1 H,s),7.70-7.78(1 H,m),7.64-7.70(1 H,m),7.50-7.63(3 H,m),7.47(2 H,d,J=7.78 Hz),7.30-7.42(2 H,m),7.21(1 H,s),5.30(1 H,d,J=7.03 Hz),3.39(3 H,s),2.67-2.80(2 H,m),2.51-2.62(2 H,m),2.19-2.29(1 H,m),2.07-2.21(1 H,m),1.60-1.72(2 H,m)。 實例5
    (2R,3S)-N-((3S)-1-(2H3)甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺
    在5 mL螺旋蓋小瓶中添加於DMF(2 mL)中之實例2(50 mg，0.092 mmol)、碳酸銫(60.1 mg，0.184 mmol)及碘甲烷-d3(6.88 μL，0.111 mmol)，得到懸浮液。在室溫下於氮氣下攪拌混合物隔夜。LCMS展示反應完成。將反應混合物溶解於2 ml 1：1 DMF/AcOH中且藉由經Luna ODS(5 μm，21.2×100 mm)進行製備型HPLC(用10%至100% ACN/水(0.1% TFA)至100%之7分鐘梯度溶離)來純化。濃縮適當溶離份，得到實例5(35 mg，65%)：HPLC：RT=3.04分鐘(CHROMOLITH® S5 ODS管柱4.6×50 mm，含有0.1% TFA之10%至90%甲醇水溶液，經4分鐘，4毫升/分鐘，在220 nm下監測)；MS(ES)：m/z=599[M+H]+；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 9.55(1 H,d,J=7.5 Hz),7.71-7.80(1 H,m),7.67(2 H,d,J=8.3 Hz),7.51-7.60(3 H,m),7.42-7.49(2 H,m),7.30-7.39(2 H,m),7.15(1 H,s),5.30(1 H,d,J=7.3 Hz),2.75-2.87(1 H,m),2.40-2.48(1 H,m),2.04-2.31(4 H,m),1.46-1.76(4 H,m)。 實例6至11
    根據實例1中所述之一般合成程序，使用由熟習此項技術者所知之方法(例如Carter,M.C.等人，J.Med.Chem.,49：2311-2319(2006))獲得之適當苯并二氮呯酮製備下列化合物。
    實例12至18
    根據實例1中所述之一般合成程序，使用由熟習此項技術者所知之方法(例如Carter,M.C.等人，J.Med.Chem.,49：2311-2319(2006))獲得之適當苯并二氮呯酮製備下列化合物。
    aXbridge Phenyl(4.6×150 mm)，3.5微米；1毫升/分鐘流速；梯度10%至100% B，經12分鐘(A：含0.05% TFA之水/CH3CN(95：5)，B：含0.05% TFA之水/CH3CN(5：95)，在220 nm及250 nm下)；25分鐘操作。bXbridge Phenyl(4.6×150 mm)，3.5微米；1毫升/分鐘流速；梯度10%至100% B，經12分鐘(A：含0.05% TFA之水/CH3CN(95：5)，B：含0.05% TFA之水/CH3CN(5：95)，在220 nm及250 nm下)；15分鐘操作。cLCMS：MeOH/H2O/0.1% TFA，BEH C18 2.1×50 mm 1.7 μ，2分鐘梯度，波長=254 nm。dMeOH/H2O/0.1% TFA，Waters Sunfire C18 2.1×30 mm，2分鐘梯度，波長=254 nm。eCHROMOLITH® ODS 4.6×50 mm(4分鐘梯度)，用含有0.% TFA之10%至90% MeOH水溶液經4分鐘溶離，4毫升/分鐘，在220 nm下監測。 實例19
    (2R,3S)-N-((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-3-(4,4,4-三氟丁基)-2-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺
    製備物19A：(2R,3R)-3-(第三丁氧羰基)-7,7,7-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)庚酸
    根據關於製備物1E所示之替代程序，自製備物9A(674 mg，2.59 mmol)及製備物1P(500 mg，1.850 mmol)製備製備物19A。得到製備物19A(521 mg，28%)：MS(ES)：m/z=379[M-H]-。
    製備物19B：(2R,3S)-3-(第三丁氧羰基)-7,7,7-三氟-2-(3,3,3-三氟丙基)庚酸
    根據經展示以增濃製備物1E與製備物1F之混合物的一般程序，自製備物19A(198 mg，0.521 mmol)製備製備物19B。得到製備物19B(192 mg，98%)：MS(ES)：m/z=379[M-H]-；1H NMR(500 MHz,CDCl3)δ ppm 2.65-2.72(1 H,m),2.60(1 H,ddd,J=10.33,8.81,3.61 Hz),2.19-2.30(2 H,m),2.06-2.16(3 H,m),1.85-1.96(1 H,m),1.70-1.81(2 H,m),1.51-1.67(3 H,m),1.47(7 H,s)。
    製備物19C：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(4,4,4-三氟丁基)己酸第三丁酯
    根據關於製備物1I所示之一般程序，自製備物19B(45.4 mg，0.119 mmol)及製備物2A(30 mg，0.119 mmol)製備製備物19C。得到製備物19C(82 mg，100%)：HPLC：RT=3.475分鐘(CHROMOLITH® 5 μ C18 4.6×30 mm(4分鐘梯度)，用含有0.1% TFA之10%至90% MeOH水溶液經4分鐘溶離，在220 nm下監測)；MS(ES)：m/z=614[M+H]+。
    製備物19D：(2S,3R)-6,6,6-三氟-3-(((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)胺甲醯基)-2-(4,4,4-三氟丁基)己酸
    根據關於製備物1K所示之一般程序，自製備物19C(73 mg，0.119 mmol)製備製備物19D。得到呈TFA溶劑合物形式之製備物19D(80 mg，100%)：HPLC：RT=2.926分鐘(CHROMOLITH® 5 μ C18 4.6×30 mm(4分鐘梯度)，用含有0.1% TFA之10%至90% MeOH水溶液經4分鐘溶離，在220 nm下監測)。
    實例19：
    根據關於實例1所示之一般程序，自製備物19D(80 mg，0.119 mmol)製備實例19。在分離非對映異構體後，得到實例19(35 mg，49%)。HPLC：RT=2.731分鐘(CHROMOLITH® 5 μ C18 4.6×30 mm(4分鐘梯度)，用含有0.1% TFA之10%至90% MeOH水溶液經4分鐘溶離，在220 nm下監測)；MS(ES)：m/z=557[M+H]+；1H NMR(500 MHz,DMSO-d6)δ ppm 10.82(1 H,s),9.42(1 H,d,J=7.21 Hz),7.65(1 H,ddd,J=8.32,7.07,1.53 Hz),7.60(1 H,d,J=2.22 Hz),7.49-7.57(3 H,m),7.42-7.49(2 H,m),7.29-7.35(2 H,m),7.20-7.28(1 H,m),7.03(1 H,s),5.23(1 H,d,J=7.21 Hz),2.70-2.79(1 H,m),2.57-2.69(1 H,m),2.39-2.47(1 H,m),2.05-2.32(3 H,m),1.50-1.67(3 H,m),1.40-1.49(1 H,m),1.24-1.39(2 H,m)。 實例20
    (2R,3S)-N1-((3S)-8-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-3-(4,4,4-三氟丁基)-2-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺
    藉由使用如關於實例19所概述之一系列反應，使用製備物19B替代製備物1E來製備實例20。經由對掌性HPLC分離所得之非對映異構體混合物，得到實例20。HPLC RT=0.89分鐘。(BEH C18 2.1×50 mm，1.7 μ，在1分鐘內0至100 B，0.5分鐘保持時間，流速=1毫升/分鐘，在254 nm下偵測，溶劑A：100%水/0.1% TFA；溶劑B：100% ACN/0.1% TFA)。MS(ES)：m/z=587.2[M+H]+。 實例21
    (2R,3S)-N-((3S)-9-((2-甲氧基乙基)胺基)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺
    製備物21A：(3-((4-甲氧基苯甲基)(2-甲氧基乙基)胺基)-2-硝基苯基)(苯基)甲酮
    在100℃下加熱(3-氯-2-硝基苯基)(苯基)甲酮(850 mg，3.25 mmol)及2-甲氧基-N-(4-甲氧基苯甲基)乙胺(3171 mg，16.24 mmol)之混合物16小時。將反應混合物分配於水(50 mL)與DCM(50 mL)之間，用DCM(3×50 mL)萃取，經Na2SO4乾燥，且使用矽膠層析(逐步梯度：30%至50%乙酸乙酯/己烷)純化，分離出呈棕色油狀之製備物21A(780 mg，產率57.1%)：LC/MS(PHENOMENEX® Luna 5微米C18 4.6×30 mm，在2分鐘內0至100 B，1分鐘保持時間，流速=5毫升/分鐘，在254 nm下偵測，溶劑A：10%甲醇/90%水/0.1% TFA；溶劑B：10%水/90%甲醇/0.1% TFA)RT=2.32；MS(ES)m/z=443.10[M+Na]+。
    製備物21B：(2-胺基-3-((4-甲氧基苯甲基)(2-甲氧基乙基)胺基)苯基)(苯基)甲酮
    將於EtOH(40 mL)及水(20 mL)中之製備物21A(700 mg，1.665 mmol)、鋅(1089 mg，16.65 mmol)及氯化銨(891 mg，16.65 mmol)加熱至90℃並維持5分鐘。經CELITE®過濾反應混合物，將其分配於水/DCM之間，用3×10 mL DCM萃取，經Na2SO4乾燥，且濃縮，分離出製備物21B(580 mg，產率89%)：LC/MS(PHENOMENEX® Luna 5微米C18 4.6×30 mm，在4分鐘內30至100 B，1分鐘保持時間，流速=5毫升/分鐘，在254 nm下偵測，溶劑A：10%甲醇/90%水/0.1% TFA；溶劑B：10%水/90%甲醇/0.1% TFA)：RT=2.47分鐘；MS(ES)：m/z=391.16[M+H]+。
    製備物21C：9-((4-甲氧基苯甲基)(2-甲氧基乙基)胺基)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-苯并[e][1,4]二氮呯-3-基胺基甲酸苯甲酯
    遵循關於製備物50D之一般程序，自製備物21B製備製備物21C(產率38.6%)：LC/MS(PHENOMENEX® Luna 5微米C18 4.6×30 mm，在4分鐘內30至100 B，1分鐘保持時間，流速=5毫升/分鐘，在254 nm下偵測，溶劑A：10%甲醇/90%水/0.1% TFA；溶劑B：10%水/90%甲醇/0.1% TFA)RT=2.42分鐘；MS(ES)：m/z=579.22[M+H]+。
    實例21：
    藉由使用如關於實例1所概述之一般反應序列，自製備物21C製備實例21。經由對掌性HPLC分離所得之非對映異構體混合物，得到實例21：LC/MS(PHENOMENEX® Luna 5微米C18 4.6×30 mm，在4分鐘內30至100 B，1分鐘保持時間，流速=5毫升/分鐘，在254 nm下偵測，溶劑A：10%甲醇/90%水/0.1% TFA；溶劑B：10%水/90%甲醇/0.1% TFA)RT=2.13分鐘；MS(ES)：m/z=616.22[M+H]+。 對照化合物22至25
    對照化合物22至25可分別根據美國專利第7,053,084號中關於實例8、12a、38及45a所述之程序來製備。
    實例26
    包含(2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺之醫藥調配物
    使用純化聚氧乙烯化蓖麻油(界面活性劑)及脫水酒精(溶劑)之50：50(v/v)組合以用於靜脈內(IV)投與之一次性即用型(RTU)無菌溶液形式調配包含(2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(實例1)之注射藥物產品。藥物產品為澄清至略混濁(乳白色)、無色至淺黃色無菌溶液，儲存於5 mL I型燧石玻璃小瓶中，用20 mm塞封閉，且用20 mm鋁密封件密封。可在投與之前用常用靜脈內稀釋劑(諸如生理食鹽水(NS)或5%右旋糖)稀釋濃調配物以得到生理學上可接受之稀產品。
    發現濃醫藥調配物在儲存於25℃/60%相對濕度、40℃/75%相對濕度及50℃下三個月時間後保持穩定。並且，光穩定性研究(HIL/UVA)指示該產品不需要避光保存。實例1之濃調配物具有長期存放穩定性，包括化學及物理穩定性。
    在靜脈內投與之前，用生理食鹽水(NS)或5%右旋糖水溶液(D5W)將濃醫藥調配物稀釋至0.01 mg/mL至0.06 mg/mL之濃度。使用時間/相容性結果指示在NS或D5W中稀釋至0.01 mg/mL至0.06 mg/mL範圍內之濃度的產品與非PVC、非DEHP IV輸注袋相容。結果展示在2℃至8℃或室溫/室內燈(25℃及約5000 lux)下儲存24小時期間基本上無變化。 生物分析
    本發明化合物之藥理學特性可藉由多種生物分析來確定。已以本發明化合物進行下文所例示之生物分析。
    洛奇蛋白-CBF1轉活化分析
    基於洛奇蛋白-CBF1(C啟動子結合因子I)細胞之轉活化分析係基於所釋放之洛奇蛋白細胞內結構域片段(NICD)連同CBF1及其他核因子一起作為轉錄因子的能力。使用螢光素酶分析法量測對洛奇蛋白-CBF1轉錄活性之拮抗作用。用含有截短型洛奇蛋白1、洛奇蛋白2、洛奇蛋白3或洛奇蛋白4受體之pCDNA3.1/Hygro質體及含有4個CBF1結合位點複本之PGL3螢光素酶報導子載體短暫共轉染HeLa子宮頸癌細胞。接著在不存在或存在測試化合物下測試細胞之洛奇蛋白-CBF1活性。在T175燒瓶(4.5×106個細胞/燒瓶)中，使用Monster轉染套組(Mirus編號MIR2906)，根據製造商說明書短暫轉染維持於DMEM(含HEPES之高葡萄糖)、1×麩醯胺酸/青黴素(penicillin)/鏈黴素(streptomycin)及10%胎牛血清中之HeLa細胞。表12指示用於轉染之各別DNA量。
    轉染後6小時，以胰蛋白酶處理細胞且以5×103個細胞/孔之密度塗佈於已塗覆聚D-離胺酸之384孔黑色組織培養盤中之95 μL分析培養基(DMEM(含HEPES之高葡萄糖)、1×麩醯胺酸/青黴素/鏈黴素、0.0125% BSA、1×非必需胺基酸)中。將含有最終濃度處於5 μM至8.4×10-5 μM(3倍連續稀釋)範圍內之測試化合物的分析培養基(5 μL)添加至細胞中，接著在37℃及5% CO2下培育細胞培養盤18小時。對照孔含有DMSO媒劑(總計數)或0.5μM原有之小分子抑制劑(背景計數)。一式兩份使用各樣品。在與50 μl STEADY-GLO®螢光素酶試劑一起培育20分鐘後，根據製造商說明書(Promega，目錄號：E2550)量測螢光素酶活性，且藉由Envision培養盤讀取器(PerkinElmer,Boston,MA)分析。
    化合物之拮抗劑作用係以100×[1-(平均樣品-平均背景)/(平均總數-平均背景)]表示，其中樣品為在測試化合物存在下之螢光素酶活性，背景等於在小分子抑制劑對照物存在下之螢光素酶活性，且總數為在DMSO孔中所誘導之信號。使用四參數邏輯擬合方程式將數據繪製成圖，且IC50值定義為抑制50%螢光素酶活性時之化合物濃度。
    下表13列出在上文洛奇蛋白-CBF1轉活化分析中所量測之本發明實例1至21及對照化合物22至25的洛奇蛋白1及洛奇蛋白3 IC50值。表13中之結果四捨五入成2個數字。如由實例1至21所例示之本發明化合物展示6.6 nM或6.6 nM以下之Notch 1 IC50值及13 nM或13 nM以下之洛奇蛋白3 IC50值。
    高通量(HT)代謝穩定性組
    非經腸投與之化合物進入血流且一或多次穿過肝臟。不由肝臟輕易地代謝之化合物可以治療有效之血漿含量投與並維持治療有效之時間。
    經口投與之化合物通常經由腸壁吸收進入血流中且首次穿過肝臟。在此首次穿過肝臟時不輕易地代謝之化合物可以治療有效量分佈至身體其他區域。
    代謝穩定性分析使用人類、大鼠、小鼠、狗及/或猴微粒體在培育10分鐘後活體外評估CYP介導之代謝穩定性。一式兩份測試各化合物。
    此等分析之結果表示為在培育10分鐘後反應混合物中殘留之母化合物的分率(殘留百分比)。一般而言，此等結果僅用於評估測試化合物之由CYP介導或NADPH依賴性代謝的程度。當化合物顯著代謝(殘留<40%至50%)時，此指示因CYP介導之代謝作用而引起高化合物活體內清除率。然而，若化合物在此等活體外分析中展現中(50%-80%)或低(>85%)代謝，則仍有可能因其他代謝及消除路徑而引起高活體內清除率。
    在假定CYP介導之代謝作用為主要消除路徑下，此等分析之殘留百分比結果預示化合物活體內清除率。在不同微粒體物種中，結果之範圍大致如表14所示。
    下表15列出在人類及小鼠代謝穩定性分析中所量測的本發明實例1至21及對照化合物22至25之CYP介導之代謝穩定性。表15中之結果四捨五入成2個數字。在肝臟微粒體分析中，殘留0%之值指示測試化合物由CYP介導之代謝完全，且100%之值指示測試化合物由CYP介導之代謝不可偵測。如由實例1至21所例示之本發明化合物針對人類肝臟微粒體(HLM)具有殘留80%或80%以上之代謝穩定性值且針對小鼠肝臟微粒體(MsLM)具有殘留72%或72%以上之代謝穩定性值。相比之下，對照化合物22至25針對人類肝臟微粒體具有殘留39%或39%以下之代謝穩定性值且針對小鼠肝臟微粒體具有殘留15%或15%以下之代謝穩定性值。

    將本發明化合物(實例1至21)與美國專利第7,456,172號中所揭示之對照化合物22至25相比較，且發現尤其有利。本發明化合物具有作為洛奇蛋白1及洛奇蛋白3之抑制劑的活性與針對肝臟微粒體優良之代謝穩定性相組合的驚人優勢。如表13及15所示，在所報導之測試中，本發明之實例1至21的洛奇蛋白1 IC50值為6.6 nM或6.6 nM以下且洛奇蛋白3 IC50值為13 nM或13 nM以下；且針對人類肝臟微粒體(HLM)具有殘留80%或80%以上之代謝穩定性值且針對小鼠肝臟微粒體(MsLM)具有殘留72%或72%以上之代謝穩定性值。相比之下，在類似測試中，對照化合物22至25的洛奇蛋白1 IC50值為5.1 nM或5.1 nM以上且洛奇蛋白3 IC50值為13 nM或13 nM以上；且針對人類肝臟微粒體具有殘留39%或39%以下之代謝穩定性值且針對小鼠肝臟微粒體具有殘留15%或15%以下的代謝穩定性值。 方法與材料
    與肝臟微粒體一起培育
    測試化合物以於100% DMSO中之3.5 mM儲備溶液形式得到。稀釋測試化合物，得到含有1.4% DMSO之50 μM乙腈(ACN)溶液，接著將其用作用於與微粒體一起培育之100×儲液。在代謝穩定性-人類、大鼠及小鼠分析組中對三個物種中之每一者或在代謝穩定性-狗或代謝穩定性-猴組中對個別物種各別地一式兩份測試各化合物。分三個步驟組合化合物、NADPH及肝臟微粒體溶液進行培育：
    1.在37℃下使蛋白質濃度為1.1 mg/ml之於100 mM NaPi(pH 7.4)、5 mM MgCl2緩衝液中之152 μl肝臟微粒體懸浮液預升溫。
    2.將1.7 μl之50 μM化合物(98.6% ACN，1.4% DMSO)添加至同一管中且在37℃下預先培育5分鐘。
    3.藉由添加17 μl預升溫之於100 mM NaPi(pH 7.4)中之10 mM NADPH溶液引發反應。
    充分混合反應組分，且將75 μl反應混合物立即轉移至150 μl淬滅/停止溶液中(零時間點，T0)。在37℃下培育反應物10分鐘，接著再將75 μl等分試樣轉移至150 μl淬滅溶液中。使用含有100 μM DMN(注射品質對照之UV標準品)的乙腈作為淬滅溶液以終止代謝反應。
    在ALLEGRA® X-12離心機SX4750轉子(Beckman Coulter Inc.,Fullerton,CA)中以1500 rpm(約500×g)離心淬滅之混合物15分鐘以使變性微粒體形成離心塊。接著將體積為90 μl之含有母化合物與其代謝物之混合物的上清液萃取物轉移至另一96孔培養盤中以進行UV-LC/MS-MS分析，從而測定混合物中殘留之母化合物的百分比。
    樣品分析-儀器
    HPLC：泵：Thermo Surveyor；自動取樣器：CTC/LEAP HTS；UV偵測器：Thermo Surveyor PDA plus；管柱：Varian C18，3 μm，2×20 mm，具有0.5 μm管線過濾器；用於結構完整性預分析之移動相：(A)含10 mM乙酸銨之98%水、2%乙腈；(B)含10 mM乙酸銨之10%水、90%乙腈；用於反應樣品分析之移動相：(A)含0.1%甲酸之98%水、2%乙腈；(B)含0.1%甲酸之2%水、98%乙腈；(C)含0.1%氫氧化銨之水；(D)含0.1%氫氧化銨之乙腈。
    質譜儀：Thermo TSQ Quantum Ultra三重四極桿質譜儀(triple-quadrapole mass spectrometer)；樣品分析：結構完整性預分析。
    使用代謝穩定性結構完整性預分析以評定所分析之化合物的純度。將57 μl 3.5 mM化合物之DMSO溶液容納於96孔培養盤中。用含有等體積乙腈、異丙醇及MilliQ-H2O之溶液18倍稀釋3.5 mM化合物DMSO儲備溶液。藉由在Thermo LCQ Deca XP Plus離子阱質譜儀上，使用具有Waters Sentry 2.1 mm保護管柱之Waters XBridge C18，5 μm，2×50 mm管柱及下表中所述之LC條件，以5 μl進樣及1毫升/分鐘之流速進行LC-UV/MS來分析所得溶液(200 μM)之結構完整性。所獲得之數據由220 nm下之UV吸光度反映純度。僅報導彼等純度大於50%之化合物的結果。
    樣品分析-培育樣品
    在裝備有加熱電噴霧(H-ESI)源之Thermo TSQ Quantum三重四極桿質譜儀上，藉由自動注入進行MS/MS條件最佳化，以獲得SRM躍遷及其相應碰撞能量值。以90微升/分鐘之流速注入於1：1甲醇：水中濃度為20 μM之化合物溶液，接著與流速為50微升/分鐘之移動相組合，之後引入加熱電噴霧源中。首先使用移動相A及B(50% A及50% B)，且必要時使用移動相C及D(亦具有50：50組成)最佳化所有化合物。將最佳化參數(包括極性、SRM躍遷及碰撞能量)儲存於Microsoft Access資料庫中。
    使用由自動注入獲得之質譜條件來分析來自代謝穩定性分析之培育樣品。進樣體積為5 μl且流速為0.8毫升/分鐘。所用梯度展示於下表中。首先使用移動相A及B以一定梯度進樣所有樣品。必要時(例如，出於層析原因)，以相同梯度，但使用移動相C及D再進樣樣品。所有LC-MS/MS分析參數以電子方式記錄於原始資料檔案中。
    資料分析
    用XCALIBUR®軟體進行峰積分。藉由比較各化合物之T10分鐘樣品之LC-MS/MS峰面積與T0分鐘樣品之LC-MS/MS峰面積來進行殘留百分比計算。
    品質對照
    在各分析培養盤中連同測試化合物一起測試一組三種化合物。只有當此等對照化合物之結果處於下文所示之預期範圍內時才接受並上傳資料。
    代謝穩定性半衰期組
    使用在人類或動物肝臟微粒體中活體外測定之代謝速率及半衰期來確定化合物之固有清除率(CLint)及肝臟清除率(CLh,b)。此等參數適用於預測活體內人類清除率，該清除率定義活體內藥物暴露量(Obach等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.,283：46-58(1997)；Obach,Drug Metab.Dispos.,27：1350-1359(1999))。
    代謝穩定性半衰期分析組評估活體外人類、大鼠、小鼠、狗及猴微粒體中CYP介導(NADPH依賴)之代謝的時程及速率。時程跨越45分鐘培育，且包括第0分鐘、第5分鐘、第10分鐘、第15分鐘、第30分鐘及第45分鐘時間點，在各時間點量測混合物中殘留之測試化合物的量。
    結果解釋準則
    此等分析之結果表示為半衰期(T1/2，分鐘)，且亦報導在各時間點反應混合物中殘留之母化合物的分率(殘留百分比)。一般而言，此等結果僅用於評估測試化合物之由CYP介導或NADPH依賴性代謝的程度。當化合物顯著代謝(T1/2<8分鐘至14分鐘)時，此指示因CYP介導之代謝作用而引起高活體內清除率。然而，若化合物在此等活體外分析中展現中(50%-80%)或低(>85%)代謝，則仍有可能因其他代謝及消除路徑而引起高活體內清除率。
    在假定CYP介導之代謝作用為主要消除路徑下，此等分析之結果預示化合物活體內清除率。在不同微粒體物種中，結果之範圍大致如下表所示：
    方法與材料
    肝臟微粒體係購自BD-Biosciences(Woburn,MA)且NADPH係購自AppliChem Inc；所有其他試劑自Sigma獲得。
    與肝臟微粒體一起培育
    測試化合物以於100% DMSO中之3.5 mM儲備溶液形式得到。稀釋測試化合物，得到含有1.4% DMSO之50 μM乙腈(ACN)溶液，接著將其用作用於與微粒體一起培育之100倍儲液。在人類、大鼠、小鼠、狗及猴肝臟微粒體中測試各化合物。分三個步驟組合化合物、NADPH及肝臟微粒體溶液進行培育：
    1.在37℃下使蛋白質濃度為1.1 mg/ml之於100 mM NaPi(pH 7.4)、5 mM MgCl2緩衝液中之450 μl肝臟微粒體懸浮液預升溫。
    2.將5 μl之50 μM化合物(98.6% ACN，1.4% DMSO)添加至同一管中且在37℃下預先培育5分鐘。
    3.藉由添加50 μl預升溫之於100 mM NaPi(pH 7.4)中之10 mM NADPH溶液引發反應。
    充分混合反應組分，且將65 μl立即轉移至130 μl淬滅/停止溶液中(零時間點，T0)。在37℃下培育反應物5分鐘、10分鐘、15分鐘、30分鐘及45分鐘且在各時間點將65 μl等分試樣轉移至130 μl淬滅溶液中。使用含有內標物(100 ng/ml)之乙腈作為淬滅溶液以終止代謝反應。
    在ALLEGRA® X-12離心機SX4750轉子(Beckman Coulter Inc.,Fullerton,CA)中以1500 rpm(約500×g)離心淬滅之混合物15分鐘以使變性微粒體形成離心塊。接著將體積為90 μl之含有母化合物與其代謝物之混合物的上清液萃取物轉移至另一96孔培養盤中以進行LC/MS-MS分析，從而測定混合物中殘留之母化合物的百分比。
    樣品分析-儀器
    HPLC：泵：Shimadzu LC-20 AD系列二元泵；自動取樣器：CTC/LEAP HTS。
    所例示之本發明化合物展示在人類(HLM)與小鼠(MsLM)代謝穩定性分析中因CYP介導之代謝作用而引起低清除率的驚人優勢。如由實例1-2、5-7、9-14、16、18、21-23及26所例示之本發明化合物在人類肝臟微粒體分析中之殘留百分比值在60%至100%範圍內，且在小鼠肝臟微粒體分析中之殘留百分比值在25%至100%範圍內。相比之下，對照化合物60-61在人類與小鼠肝臟微粒體分析中之殘留百分比值為7.0%或7.0%以下。對照化合物61-62在人類與小鼠代謝穩定性分析中展示高清除率，指示該等化合物在肝臟中由CYP介導之代謝作用移除。
    人類腫瘤異種移植小鼠模型
    所有齧齒動物均獲自Harlan Sprague Dawley Co.(Indianapolis,Indiana)，且在無氨環境中維持於確定且無病原體群落中。隔離所有小鼠約1週，之後將其用於腫瘤增殖及藥物功效測試。小鼠隨意取食食物及水。百時美施貴寶醫藥研究所(Bristol-Myers Squibb Pharmaceutical Research Institute)之動物照護計劃完全由美國實驗室動物照護評鑒協會(American Association for Accreditation of Laboratory Animal Care，AAALAC)認可。所有實驗根據百時美施貴寶(BMS)動物測試方法及準則進行。
    使腫瘤異種移植物在免疫功能降低之balb/c nu/nu裸小鼠或NOD-SCID小鼠(Harlan Sprague Dawley)中皮下(SC)生長並維持。使用自供體小鼠獲得之腫瘤碎片使腫瘤在適當小鼠品系(表22)中以皮下移植物形式增殖。
    臨床前化學療法試驗
    在實驗開始時彙集偵測有意義之反應需要之所需數目之動物且用13號套管針給與各動物腫瘤碎片之皮下植入物(約20 mg)。使腫瘤生長至預定尺寸窗(size window)(排除該範圍以外之腫瘤)且將動物平均分配至各個處理組及對照組中。每個處理組及對照組通常8隻小鼠，其中例外為在SAL-IGF(此未包括在表22中)腫瘤模型中進行之實驗，其中每個處理組及對照組通常5隻小鼠。基於個別體重處理各動物。每天檢查經處理之動物之處理相關毒性/死亡。在開始處理之前對各組動物進行稱重(Wt1)，且在最後一次處理給藥後再次稱重(Wt2)。體重差(Wt2-Wt1)提供處理相關毒性之量度。
    藉由每週兩次用測徑規量測腫瘤來確定腫瘤反應，直至腫瘤達到0.5 gm或1 gm之預定「目標」尺寸為止，視腫瘤類型而定。自下式估算腫瘤重量(mg)：腫瘤重量=(長度×寬度2)÷2腫瘤反應準則以腫瘤生長抑制(%TGI)表示。腫瘤生長延遲定義為經處理之腫瘤(T)達到預定目標尺寸所需之時間(天)相較於對照組(C)的差值。出於此目的，各組之腫瘤重量表示為中值腫瘤重量(MTW)。
    腫瘤生長抑制係如下計算： 其中，Ct=在處理結束時中值對照組腫瘤尺寸C0=在處理開始時中值對照組腫瘤尺寸Tt=在處理結束時處理組之中值腫瘤尺寸T0=在處理開始時處理組之中值腫瘤尺寸
    活性係定義為達成50%或50%以上持久腫瘤生長抑制(亦即TGI50%)並維持相當於至少1個腫瘤體積倍增時間之時間，且藥物處理須維持相當於至少2個腫瘤體積倍增時間之時間。
    腫瘤反應亦以腫瘤生長延遲(TGD值)表示，定義為經處理之腫瘤(T)達到預定目標尺寸所需之時間(天)相較於對照組(C)的差值。
    在可能時，在直至最大耐受劑量(MTD)之劑量範圍內測定抗腫瘤活性，該最大耐受劑量係定義為僅低於出現過量毒性(亦即，一例以上死亡)之劑量的劑量。當出現死亡時，記錄死亡日。在腫瘤達到目標尺寸之前死亡之經處理小鼠視作因藥物毒性而死亡。無帶有小於目標尺寸之腫瘤的對照小鼠死亡。具有一例以上因藥物毒性所致之死亡的處理組視作經受過度毒性處理且其資料不納入評估化合物之抗腫瘤功效。
    影響處理可耐受性之潛在藥物毒性相互作用為組合化學療法試驗中之重要考慮事項。對組合治療結果之解釋須基於比較在類似耐受劑量下單個藥劑與組合之最佳可能反應的抗腫瘤活性。因此，治療協同作用係定義為以組合藥劑之耐受方案達成之治療作用超過在單一療法之任何耐受劑量下所達成之最佳作用。使用葛氏廣義威爾卡遜檢驗(Gehan's generalized Wilcoxon test)對資料進行統計學評估。在P<0.05時表示具統計顯著性。
    藥物投與
    在活體外研究中，將所有藥劑溶解於100% DMSO中，且在培養基/10%胎牛血清中連續稀釋。為投與齧齒動物洛奇蛋白抑制劑，使用兩種不同賦形劑：[1]94%拉巴非爾(Labrafil)/5% ETOH/1% TW80，或[2]ETOH/TPGS/PEG300(10：10：80)。雖然通常以QD×15(10天給藥，2天中止)之時程經口投與洛奇蛋白抑制劑，但其他時程亦經評估且展示為有效的。舉例而言，由QD×12(4天給藥，3天中止)組成之給藥方案展示與QD×15(10天給藥，2天中止)同樣有效。
    活體內抗腫瘤活性
    在植入小鼠體內之人類腫瘤異種移植物中評估經由靜脈內途徑(IV)投與之實例1之抗腫瘤活性。如圖6所示，實例1展現抗腫瘤活性。
    下表23列出在人類腫瘤異種移植小鼠模型中所量測之本發明實例之抗腫瘤活性。如由實例1及2所例示之本發明化合物在經口投與(PO)下展示抗腫瘤活性。
    實例1針對在小鼠體內生長之廣泛人類癌症異種移植物表現廣譜抗腫瘤活性。針對16種人類癌症異種移植物表現顯著抗腫瘤活性，包括人類T細胞急性淋巴母細胞性白血病、乳癌、胰臟癌、卵巢癌、神經膠母細胞瘤、非小細胞肺癌、結腸癌、骨原性肉瘤及神經母細胞瘤(表24)。
    進行一系列研究以評估實例1與多種抗癌劑之可組合性，該等抗癌劑包括達沙替尼、太平洋紫杉醇、他莫西芬、地塞米松及卡鉑。
    I.實例1與達沙替尼
    使用人類T細胞淋巴母細胞性白血病評估實例1與達沙替尼之組合功效。達沙替尼處理單獨產生1.7 LCK之抗腫瘤作用(10 mg/kg/adm，QD×49，PO)。實例1化合物在3.75 mg/kg至7.5 mg/kg之劑量範圍下僅產生0.1 LCK至0.5 LCK之中度活性。然而，兩種藥劑之組合產生協同抗腫瘤活性，產生>>2.6 LCK之抗腫瘤功效，顯著優於單獨達沙替尼單個藥劑(P<0.05)。另外，組合方案對100%小鼠產生完全反應(CR)，而單個藥劑中無一者產生CR(圖7至8及表25)。
    II.實例1與太平洋紫杉醇
    評估實例1與太平洋紫杉醇組合對MDA-MB-468乳癌之抗腫瘤功效。實例1作為單個藥劑在3.75 mg/kg/adm至7.5 mg/kg/adm之劑量範圍內產生0.5 LCK至1.4 LCK。以12 mg/kg/adm之劑量每週一次投與之太平洋紫杉醇產生0.5 LCK(圖9至10及表26)。劑量範圍為3.75-7.5 mg/kg/adm之實例1與太平洋紫杉醇之組合產生3.4 LCK至4.1 LCK之抗腫瘤作用，顯著優於單獨單個藥劑實例1化合物(分別P=0.0006及0.0002)。
    III.實例1與他莫西芬
    評估實例1與他莫西芬組合對在雌性nu/nu小鼠體內生長之ER受體陽性人類乳癌異種移植物MCF7之抗腫瘤功效。實例1作為單個藥劑在3.75-7.5 mg/kg/adm之劑量範圍內產生43%至58%之腫瘤生長抑制(TGI)而無CR或PR。以20 mg/kg/adm之MTD劑量(IP，Q2D×12)投與之他莫西芬產生78%之TGI%而無CR或PR。實例1化合物與他莫西芬之組合具有明顯之協同效應，在7.5 mg/kg/adm及3.75 mg/kg/adm之實例1劑量下分別產生101及99之TGI%。此外，約50%接受組合之小鼠當PR或CR時經歷腫瘤縮小(圖11至12及表27)。
    IV.實例1與地塞米松
    評估實例1與糖皮質激素地塞米松組合對在NOD-SCID小鼠體內生長之人類T-ALL白血病異種移植物HPB-ALL之抗腫瘤功效。實例1作為單個藥劑對此模型具有活性，在7.5 mpk下產生1.1 LCK。地塞米松作為單個藥劑具有中度活性，在其7.5 mpk之MTD下產生0.7 LCK。實例1與地塞米松之組合產生1.9 LCK，顯著優於單獨任一個別單個藥劑(圖13及表28)。
    V.實例1與卡鉑
    評估實例1與卡鉑組合對在雌性nu/nu小鼠體內生長之人類卵巢畸胎癌異種移植物PA-1之抗腫瘤功效。實例1作為單個藥劑在1 mg/kg/adm之劑量下產生0.2 LCK。以90 mg/kg/adm之劑量每週一次投與之卡鉑產生2.1 LCK(圖14及表29)。劑量為1 mg/kg/adm之實例1與卡鉑之組合產生>3.1 LCK之抗腫瘤作用，顯著優於單獨單個藥劑實例1化合物(P=0.004)。
    單晶x射線繞射測定法
    在Bruker-AXS APEX2 CCD系統上使用Cu Kα輻射(λ=1.5418 Å)收集單晶數據。用APEX2軟體程式套件對所量測到之強度數據進行求指數及處理。當指示時，在數據收集期間在Oxford低溫系統之冷流中冷卻晶體。藉由直接法解析結構且使用SHELXTL基於所觀測到之反射進行精修。經由全矩陣最小二乘法精修所導出之原子參數(座標及溫度因子)。在精修中最小化之函數為Σw(|Fo|-|Fc|)2。R定義為Σ∥Fo|-|Fc∥/Σ|Fo|，同時R w =[Σw(|Fo|-|Fc|)2/Σw|Fo|2]1/2，其中w為基於所觀測到之強度之誤差的適當加權函數。通常，所有非H原子各向異性地精修且除連接至N及O原子之H原子以外的所有H原子藉由幾何方法計算且使用騎式模型(riding model)精修。
    X射線粉末繞射測定法
    使用Bruker GADDS(總區域偵測繞射系統(General Area Detector Diffraction System))手動X平台測角器獲得x射線粉末繞射(PXRD)數據。將粉末樣品置放於直徑為0.7 mm之薄壁玻璃毛細管中；在數據收集期間旋轉毛細管。樣品與偵測器之距離保持在17 cm。在2.5°<2θ<35°範圍內，以Cu Kα輻射(λ=1.5418 Å)收集數據，其中樣品暴露時間為600秒。
    圖1展示實例1化合物之N-1形式之實驗(在約25℃下)及模擬(在約25℃下)PXRD圖(CuKα λ=1.5418 Å)。
    圖2展示實例1化合物之A-2形式之實驗(在約25℃下)及模擬(在約25℃下)PXRD圖(CuKα λ=1.5418 Å)。
    圖3展示實例1化合物之EA-3形式之實驗(在約25℃下)及模擬(在約25℃下)PXRD圖(CuKα λ=1.5418 Å)。
    圖4展示實例1化合物之THF-2形式之實驗(在約25℃下)及模擬(在約-50℃下)PXRD圖(CuKα λ=1.5418 Å)。
    圖5展示實例2化合物之M2-1形式之實驗(在約25℃下)及模擬(在約25℃下)PXRD圖(CuKα λ=1.5418 Å)。
    圖6展示實例1針對TALL1人類T細胞急性淋巴母細胞性白血病之抗腫瘤功效。各符號表示一組8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(●)對照組；(■)實例1，5 mg/kg/adm，QD×3，IV。
    圖7展示實例2對T細胞急性淋巴母細胞性白血病細胞株TALL1之活體內抗腫瘤活性。各符號表示一組8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(●)對照組；(△)實例2，12 mg/kg，QD×15；(■)實例2，6 mg/kg，QD×15；( )實例2，3 mg/kg，QD×15；(▲)實例2，1.5 mg/kg，QD×15；(○)實例2，0.75 mg/kg，QD×15。
    圖8展示實例2對人類乳癌細胞株MDA-MB-157之活體內抗腫瘤活性。各符號表示一組8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(○)對照組；(▲)實例2，24 mg/kg；(■)實例2，18 mg/kg；(●)實例2，12 mg/kg。
    圖9展示實例1與達沙替尼之組合化學療法對ALL-SIL T細胞淋巴母細胞性白血病之協同抗腫瘤功效。各符號表示一組8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(●)對照組；(◆)實例1，3.75 mg/kg/adm，QD×3，每週一次並維持7週，PO；(■)達沙替尼，10 mg/kg/adm，QD×49，PO；(□)實例1，3.75 mg/kg/adm，QD×3，每週一次並維持7週，PO+達沙替尼，10 mg/kg/adm，QD×49，PO。當在同一天投與時，大約同時給與兩種藥劑(實例1在達沙替尼前1小時以內投與)。
    圖10展示實例1與達沙替尼之組合化學療法對ALL-SIL T細胞淋巴母細胞性白血病之協同抗腫瘤功效。各符號表示一組8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(●)對照組；(◆)實例1，7.5 mg/kg/adm，QD×3，每週一次並維持7週，PO；(■)達沙替尼，10 mg/kg/adm，QD×49，PO；(□)實例1，7.5 mg/kg/adm，QD×3，每週一次並維持7週，PO+達沙替尼，10 mg/kg/adm，QD×49，PO。當在同一天投與時，大約同時給與兩種藥劑(實例1在達沙替尼前1小時以內投與)。
    圖11展示實例1與太平洋紫杉醇之組合化學療法對MDA-MB-468人類乳癌之協同抗腫瘤功效。各符號表示一組8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(●)對照組；(◆)太平洋紫杉醇，12 mg/kg/adm，Q7D×6，IV；(▲)實例1，3.75 mg/kg/adm，QD×3，每週一次並維持7週，PO；(□)實例1與太平洋紫杉醇之組合。
    圖12展示實例1與太平洋紫杉醇之組合化學療法對MDA-MB-468人類乳癌之協同抗腫瘤功效。各符號表示一組8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(●)對照組；(◆)太平洋紫杉醇，12 mg/kg/adm，Q7D×6，IV；(▲)實例1，7.5 mg/kg/adm，QD×3，每週一次並維持7週，PO；(□)實例1與太平洋紫杉醇之組合。
    圖13展示實例1與他莫西芬之組合化學療法對MCF7人類乳癌之協同抗腫瘤功效。各符號表示一組8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(●)對照組；(■)他莫西芬，20 mg/kg/adm，Q2D×12，IP；(◆)實例1，3.75 mg/kg/adm，QD×3，每週一次並維持3週，PO；(□)實例1與他莫西芬之組合。
    圖14展示實例1與他莫西芬之組合化學療法對MCF7人類乳癌之協同抗腫瘤功效。各符號表示一組8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(●)對照組；(■)他莫西芬，20 mg/kg/adm，Q2D×12，IP；(◆)實例1，7.5 mg/kg/adm，QD×3，每週一次並維持3週，PO；(□)實例1與他莫西芬之組合。
    圖15展示實例1與地塞米松(Dexa)之組合化學療法對人類T-ALL白血病異種移植物HPB-ALL的協同抗腫瘤功效。各符號表示一組6至8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(●)對照組；(◆)地塞米松，7.5 mg/kg/adm，QD×14，IP；(△)實例1，3.75 mg/kg/adm，QD×3，每週一次並維持3週，PO；(□)實例1與地塞米松之組合。
    圖16展示實例1與卡鉑之組合化學療法對PA-1人類卵巢畸胎癌之協同抗腫瘤功效。各符號表示一組8隻小鼠之中值腫瘤負荷。(●)對照組；(□)卡鉑，90 mg/kg/adm，Q7D×3，IV；(△)實例1，1 mg/kg/adm，QD×21，PO；(◆)實例1與卡鉑之組合。
    权利要求:
    Claims (14)
    [1] 一種式(I)化合物， 其中：R1為-CH2CF3或-CH2CH2CF3；R2為-CH2CF3、-CH2CH2CF3或-CH2CH2CH2CF3；R3為H或-CH3；各Ra獨立地為F、Cl、-CN、-OCH3及/或-NHCH2CH2OCH3；且z為0、1或2。
    [2] 如請求項1之化合物，其中：R1為-CH2CF3或-CH2CH2CF3；且R2為-CH2CF3或-CH2CH2CF3。
    [3] 如請求項1之化合物，其中：z為0或1。
    [4] 如請求項1之化合物，其中：R1為-CH2CH2CF3；且R2為-CH2CH2CF3。
    [5] 如請求項4之化合物，其中：z為0或1。
    [6] 如請求項1之化合物，其中：z為1或2。
    [7] 如請求項1之化合物，其選自：(2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(1)；(2R,3S)-N-((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(2)；(2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-3-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(3)；(2R,3S)-N-((3S)-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-3-(2,2,2-三氟乙基)-2-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(4)；(2R,3S)-N-((3S)-1-(2H3)甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(5)；(2R,3S)-N-((3S)-7-氯-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(6)；(2R,3S)-N-((3S)-8-甲氧基-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(7)；(2R,3S)-N-((3S)-8-氟-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(8)；(2R,3S)-N-((3S)-7-甲氧基-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(9)；(2R,3S)-N-((3S)-7-氟-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(10)；(2R,3S)-N-((3S)-8-氯-1-甲基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(11)；(2R,3S)-N-((3S)-9-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(12)；(2R,3S)-N-((3S)-8-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(13)；(2R,3S)-N-((3S)-7-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(14)；(2R,3S)-N-((3S)-8-氰基-9-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(15)；(2R,3S)-N-((3S)-8,9-二氯-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(16)；(2R,3S)-N-((3S)-9-氟-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(17)；(2R,3S)-N-((3S)-9-氯-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(18)；(2R,3S)-N-((3S)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-3-(4,4,4-三氟丁基)-2-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(19)；(2R,3S)-N1-((3S)-8-甲氧基-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-3-(4,4,4-三氟丁基)-2-(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(20)；及(2R,3S)-N-((3S)-9-((2-甲氧基乙基)胺基)-2-側氧基-5-苯基-2,3-二氫-1H-1,4-苯并二氮呯-3-基)-2,3-雙(3,3,3-三氟丙基)丁二醯胺(21)。
    [8] 如請求項1之化合物，其選自：
    [9] 如請求項8之化合物，其中該化合物為：
    [10] 如請求項9之化合物，其中該化合物呈結晶形式N-1，其特徵在於以下一者：a)模擬粉末x射線繞射圖實質上如圖1所示及/或觀測PXRD圖實質上如圖1所示；b)粉末x射線繞射圖包含四個或四個以上，較佳為五個或五個以上選自以下之2θ值(CuKα λ=1.5418 Å)：5.7±0.2、7.5±0.2、10.3±0.2、10.7±0.2、15.2±0.2、16.8±0.2、20.2±0.2及20.7±0.2，其中形式N-1之該PXRD圖係在約20℃之溫度下量測；c)單位晶胞參數實質上等於以下：晶胞尺寸：a=9.41 Å b=17.74 Å c=31.94 Å α=90.0° β=98.4° γ=90.0°空間群：P21該化合物之分子/不對稱單位：4其中形式N-1之該等單位晶胞參數係在約-10℃之溫度下量測；及/或d)約25℃溫度下之原子分數座標實質上如表1中所列。
    [11] 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至10中任一項之化合物；及醫藥學上可接受之載劑。
    [12] 如請求項1至10中任一項之化合物，其用於治療癌症之療法中。
    [13] 如請求項1至10中任一項之化合物，其用於製造治療癌症之藥物。
    [14] 一種組合，其含有如請求項1至10中任一項之化合物；及用於治療癌症的選自達沙替尼(dasatinib)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、他莫西芬(tamoxifen)、地塞米松(dexamethasone)及卡鉑(carboplatin)之一或多種其他藥劑，供相繼或同時使用。
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    法律状态:
    优先权:
    申请号 | 申请日 | 专利标题
    US201161466238P| true| 2011-03-22|2011-03-22||
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